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- 2026-04-28 发布于湖北
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环介导恒温扩增技术(LAMP)研究的文献综述
1.1环介导等温扩增技术(LAMP)的反应体系
环介导等温扩增技术(Loop-?mediated?Isothermal?Amplification,LAMP),是针对目标基因的6个区域设计出4条特异性引物,在恒温条件下(65℃左右)加入链置换DNA聚合酶,可在40-60min之内完成核酸扩增反应,将目标DNA片段扩增109~1010倍,具有恒温快速扩增和高特异性的特点REF_Ref20152\n\h[48]。
(1)引物:引物设计是整个LAMP反应的关键点,设计出好的引物可以更高效的完成扩增反应。引物可以分为正向内部引物、正向外部引物、反向内部引物和反向外部引物4条特异性引物。在反应的起始阶段4条特异性引物与目标DNA片段的某些区域进行碱基互补配对,是反应的关键,因此不同大小不同碱基序列的引物是否可以进行互补融合,其中选择合适的温度范围也是反应高效的关键一步REF_Ref20302\n\h[49-50]。由内引物(F2和B2)所指导的融合反应所需温度较高(63℃左右),而外引物(F3和B3)引导所指导的融合反应温度要求相对不高,因此温度控制在60-63℃左右时,可以保证内引物(F2和B2)所指导的融合反应发生的更早REF_Ref20416\n\h[51]。
(2)模板DNA:因为对
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