2025年临床医学实验技术手册.docxVIP

2025年临床医学实验技术手册

第1章基础实验技能与仪器操作规范

1.1无菌操作与培养基制备规范

无菌操作开始前，必须严格执行“七步洗手法”，使用含酒精75%的洗手液彻底清洁双手，待其自然干燥后，再佩戴双层无菌手套，这是防止微生物污染的第一道防线。在配制培养基时，需使用超净工作台或生物安全柜进行，将接种环或接种针在酒精火焰旁灼烧3秒，确保达到无菌状态，然后迅速伸入无菌琼脂平板中心进行灭菌，避免培养基表面温度过高导致细菌滋生。

培养基分装过程中，必须严格遵循“先加琼脂、后加液体”的顺序，若颠倒顺序，琼脂凝固后液体无法溶解，将导致培养基凝固成块，无法使用，因此需经常搅拌使液体与固体充分混合。封口膜的选择至关重要，必须选用耐热灭菌的聚乙烯封口膜，并在封口膜上标记好培养基的名称、批号、配制日期和配制人姓名，以便后续追溯和防止交叉污染。倒平板操作时，应使用无菌移液枪将培养基倒入无菌培养皿中，倒入量约为培养皿容积的1/3至1/2，以防倒出过多导致培养皿过大，也不宜过少以免培养皿过小。

倒好平板后，需将培养皿在火焰旁静置30秒以上，直至培养基表面完全凝固成透明、平整的镜面，此时方可开启培养皿盖，以防污染。

1.2常见实验室安全仪器操作规范

移液枪的使用需遵循“先吸、后拔”的原则，吸取液体前先用枪尖轻触管壁以排出气泡，吸取完毕后立即拔出枪头，若长时间