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常用缓冲液的配制

一、缓冲液的基本原理简述

缓冲溶液通常由一对具有缓冲作用的共轭酸碱对组成。当体系中加入少量强酸时，共轭碱会与之结合；加入少量强碱时，共轭酸会释放氢离子予以中和，从而使溶液的pH值维持在一个相对稳定的范围内。不同的缓冲对具有不同的最佳缓冲范围（通常为其pKa值±1），因此在选择缓冲液时，首要考虑的是其pKa值是否与实验所需的pH范围相匹配。

二、常用缓冲液的配制方法

（一）磷酸缓冲盐溶液（PBS,PhosphateBufferedSaline）

PBS是生物实验中应用最为广泛的缓冲液之一，主要用于清洗组织、细胞，以及作为许多反应的基础介质。其特点是具有较好的pH缓冲能力，且对多数生物活性物质影响较小。

常用配方（1×PBS）：

通常包含磷酸二氢盐、磷酸氢盐和氯化钠。具体配制步骤如下：

1.准备去离子水或超纯水。

2.分别称取适量的磷酸二氢钾（KH?PO?）、磷酸氢二钠（Na?HPO?·12H?O或Na?HPO?·2H?O，根据水合状态调整用量）和氯化钠（NaCl）。例如，一种常见配方为：KH?PO?0.2g，Na?HPO?·12H?O2.9g，NaCl8.0g。

3.将上述试剂依次溶解于约800毫升水中。

4.用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）溶液调节pH至所需值（通常为7.2-7.4）。

5.加去离子水定容至1000毫升。