（共21页PPT）第4讲第二章第一节基因工程工具酶.pptVIP

**湖南师范大学生命科学学院第4讲工具酶（一）基因工程第二章基因工程工具酶和载体湖南师范大学生命科学学院袁婺洲本章目录2.1工具酶2.2克隆载体2.3表达载体第一节工具酶剪切：限制性核酸内切酶连接：DNA连接酶生产：DNA聚合酶修饰：碱性磷酸酶末端转移酶其他工具酶一、限制性核酸内切酶识别双链DNA分子中的特定序列，并切割DNA双链1968年，Smith等人首先从流感嗜血杆菌d株中分离出HindII和HindIII主要存在于原核细菌中，细菌的限制与修饰作用，帮助细菌限制外来DNA的入侵限制性核酸内切酶的命名Haemophilusinfluenzaed嗜血流感杆菌d株属名种名株名HindIII限制性核酸内切酶的分类特性I型II型III型限制和修饰活性双功能的酶核酸内切酶和甲基化酶分开双功能的酶酶蛋白分子组成3种不同的亚基单一亚基两种不同的亚基限制作用所需的辅助因子ATP、Mg2+Mg2+ATP、Mg2+特异性识别位点非对称序列回文对称结构非对称序