第3章-植物组织培养与细胞.pptVIP

1.单细胞制备方法:愈伤组织或悬浮培养物(常);用纤维素酶和果胶酸酶从组织分离（1)机械法（2)酶解法（3)愈伤组织诱导法由组织器官经愈伤组织分离单细胞步骤:1)诱导产生愈伤组织；2)愈伤组织反复继代，使组织不断增殖，提高愈伤组织松散性；茎段悬浮振荡培养3)将愈伤组织在液体培养基中培养，建立悬浮培养物优点：细胞团成小细胞团或单细胞;在培养基中均匀分布;有空气交流。2.单细胞培养方法（Singlecellculture)单细胞培养常用的方法:单细胞培养方法看护培养法微室培养法固体平板培养法液体浅层培养法（1)看护培养法（Nurseculture)用途:诱导形成单细胞系。含义:指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，并使其生长和增殖的方法。用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,并使其生长和增殖。这个愈伤组织块称为看护愈伤组织a.看护培养的含义及用途（1)在一个培养瓶中加入一定量厚的固体培养基，灭菌后备用。（2)在无菌条件下，将一小块（1cm3)活跃生长的愈伤组织接种到培养基上，再在愈伤组织块上放一片（1cm2)已灭菌的滤纸，放置一晚上。（3)将分离的单细胞接种到培养基的滤纸上。（4)恒温培养。b.看护培养基本技术优点