饲料中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素含量的HPLC测定方法.pdfVIP

维普资讯 第 23卷，第6期 光 谱 实 验 室 VoJ．23，No 6 2006年 11月 ChineseJournalofSpectroscopyLaboratory November，2006 饲料中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素含量的 HPLC测定方法 戴华① 王美玲 李拥军 朱中武 (湖南出入境检验检疫局技术中心 长沙市沙子塘路 161号 410007) 摘 要 采用微量化样品处理技术，用乙酸乙酯提取饲料样品中的氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素，并 经液一液分配净化后．用反相液相色谱梯度洗脱双波长对3种组分进行同时分离测定。外标法定量。检出限 为 0．020mg／kg，回收率大于 7O ．RSD小于 17．2 。 关键词 饲料，氯霉素．甲砜霉紊．氟甲砜霉素，高效液相包谱。 中图分类号 ：0657．72 文献标识码：A 文章编号 ：1004—8138(2006)06—1208—05 1 前言 氯霉素(chloramphenico1)、甲砜霉素 (Thiamphenico1)和氟甲砜霉素(FJorfenico1)属于酰胺醇类 抗菌素，后两者是氯霉素的衍生物，它们的化学性质见表l。 表 1 3种酰胺醇类抗菌素的化学性质 氯霉素，2，2一二氯 Ⅳ一[2一羟基一1一(羟甲基)一2一(4一硝基苯基)一乙基]乙酰胺，具有左旋光性，又名 左霉素，略溶于水，pHlO以上失去活性。易溶于乙醇、甲醇、丙二醇、丙酮及乙酸乙酯，不溶于苯及 石油醚，是一种有效的广谱抗生素。由于其对多种病原菌有较强的抑制作用，曾在养殖业广泛使用， 但由于氯霉素能抑制人体骨髓造血功能，引起人类再生障碍性贫血、粒状 白细胞缺乏症、新生儿、早 ① 联系人，电话{(0731)5385203；(0731)5385202{E-mail：ddaihua@yeah、net 作者简介：~ (1964-一)．男，湖南省测阳县人，研究员，主要从事食品理化检验和食品安全方法学研究 收稿 日期：2006—06—2g；接受 口期t2006—08—15 维普资讯 第 6；现 戴华等 饲料中氯霉素 甲砜霉素和氟 甲砜霉素台量的HPLC测定方法 产儿灰色综合症等疾病，且低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性，因此氯霉素残留问题已引 起国际组织和世界许多国家和地区的高度重视。欧盟、美国、香港特别行政区政府均在法规中将氯 霉素列为禁用兽药，动物组织中不得检出，我国农业部已将氯霉素从2000年的 《中国兽药典》中删 除 。 甲砜霉素 ，D苏型～2，2一二氯一Ⅳ一[一羟基一a(羟甲基)一P一(甲磺酰基)苯乙基]乙酰胺，是氯霉素 的类似物，对光、热稳定，有吸湿性。室温下水中的溶解度为0．5 一1．oK，醇中的溶解度为59／6，被 称为第二代氯霉素 。 氟甲砜霉素，2，2一二氯一Ⅳ一[1一(氟甲基)～2一羟基2(4一(甲磺酰基)乙基)乙酰胺]，是甲砜霉素的 氟化衍生物，被称为第三代氯霉素。后两种药物有效地克服了氯霉素导致再生障碍性贫血的缺陷。 甲砜霉素和氟甲砜霉素由于没有氯霉素的缺陷，作为氯霉素的替代品，允许作为兽药使用。在 防治猪呼吸道疾病时，添加到饲料中的水平一般在 20--40mg／kg。 国内外关于饲料中3种酰胺醇类抗菌素含量同时检测的方法还未见有报道。饲料主要报道的 是氯霉素的检测方法，葛明伟等叫采用高效液相色谱测定了饲料中氯霉素含量，样品经甲醇提取然 后用中性氧化铝净化，紫外测定，检出限为 lmg／kg。PilarVinas等乜]采用液相色谱二极管阵列检测 器研究了饲料中氯霉素残留的检测方法，样品经乙酸乙酯提取后，用DiscoveryDSC一18It固相萃取 小柱净化后进行测定。 多种酰胺醇类抗菌素药物的检验方法集中在组织样品中残留量的检测，采用的方法有GC— EcDL3．4J、液相色谱一质谱测定法[5]，这些方法对于提取的样液均采取固相萃取技术进行净化后进行 测定 。 由于饲料的杂质和干扰物质相对于组织样品多且复杂，而且饲料中允许加入甲砜霉素和氟甲 砜霉素，如果饲