虾肉中氯霉素 甲砜霉素 氟苯尼考及氟苯尼考胺残留气相色谱-微电子捕获检测法.pdfVIP

维普资讯 66 中国兽医杂志 2006年(第42卷)第 10期 虾肉中氯霉素 甲砜霉素 氟苯尼考 及氟苯尼考胺残留气相色谱一微 电子捕获检测法 孙丰云，张素霞，沈建忠，李建成 (中国农业大学动物医学院，北京 海淀 100094) 中图分类号：$859．84 文献标识码 ：B 文章编号：0529—6005(2006)lO-0066～03 氯霉素类药物是一类广谱抗生素 ，主要包括氯 1．2．1 标准贮备液(1mg／m1) 准确称取氯霉素、甲 霉素 (CAP)、甲砜霉素 (TAP)和氟苯尼考 (FF)，兽 砜霉素、氟苯尼考 、氟苯尼考胺标准品各25mg，分别 医临床上用于治疗畜禽的细菌性疾病 。但 由于氯霉 置于25ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，充分摇匀， 素具有抑制造血功能及引起再生障碍性贫血等毒性 配制成1mg／ml的标准贮备液，密封，一2OC保存。 作用 ，因此许多国家都禁止将其应用于食品动物。甲 l-2．2 混合标准中间液 (5000ng／m1)从冰箱中取 砜霉素的毒性较氯霉素低 ，但其抗菌效能不及氯霉 出4种标准贮备液 ，回复至室温 ，用移液管分别量取 素。而氟苯尼考作为新型氯霉素类抗生素，在安全性 0．5ml于一 1O0ml容量瓶 中，用 乙腈定容 ，密封。 和有效性方面比氯霉素和 甲砜霉素具有 明显的优 4C保存备用 。 势 ，已在养殖业 中大规模使用 ，但由于兽医临床的滥 1．3 色谱条件 进样 口温度 ：250C，无分流模式； 用、误用 ，细菌耐药性问题越来越严重 ，因此我国、欧 色 谱 柱：Agilent19091Z一433，325CMax，HP一1 盟及美国均规定 了动物组织中氟苯尼考的最大残留 MethylSiloxane，Capillary30．01TI×250 m ×0．25 限量 。氟苯尼考在动物组织中的主要代谢产物为氟 mnominal，恒压模式 ，P一20．00psi；柱温：程序升 苯尼考胺口]，因此通常以氟苯尼考胺作为动物体内 温模式 ，初温 ：150C，保持0．5rain。升温速率 ：3OC／ 氟苯尼考的残 留标示物 ]。 rain，终温：270C，保持 10rain；检测器温度：300C； 动物组织 中氯霉素类药物残 留检测报道较多， 载气 ：氮气 (99．999 )；进样体积 ：3 l^ 主要包括高效液相色谱法 (HPLC)E3．4]、气相色谱法 1．4 标准曲线的绘制 将混合标准中间液用乙腈 (GC)[5]、气相色谱一质谱法 (GC—MS)E6．7]、液相色谱一 分 别 稀释 至 1000ng／ml、250ng／ml、50ng／ml、 质谱法 (LC—MS)_8j、酶联免疫检测法 (ELISA)_9j，但 25ng／ml、5ng／ml，对应 的组织样 品浓度分别为2O 上述方法多用于检测单一药物 。而同时检测动物组 ~g／kg、5~g／kg、1~g／kg、0．5~g／kg、0．1~g／kg。取 织 中CAP、TAP、FF及FFa残留的方法 目前国内外 上述标准工作液各 1OO l，加 100 l乙腈 ，衍生化后 报道较少_】“]，国内同时检测动物组织 中CAP、 进行测定。以分析物响应值峰面积为纵坐标，组织样 TAP、FF及FFa残留的分析方法尚未见报道 。本研 品浓度为横坐标绘制标准曲线 。 究建立了能同时检测虾 肉中CAP、TAP、FF及 FFa 1．5 样品前处理 称取5．0g已匀浆的虾肉，置于50 残留量的气相色谱一微 电子捕获检测方法 ，为动物组 ml聚丙烯离 心管 中，加 20ml乙酸 乙酯一氨水 织中氯霉素类药物残 留的监控提供灵敏度高、简便 (98：2)，涡动2rain，4000r／rain离心5rain。将上清 快速的检测技术。 液转入 1