常用有丝分裂观察植物根尖的培养研究.docVIP

【标题】常用有丝分裂观察植物根尖的培养研究 【作者】罗光斌 【关键词】有丝分裂??植物根尖??培养研究 【指导老师】何秀利 【专业】生物 【正文】1?前言人们很清楚，遗传学的发展与人们的生产、生活密切相关。进入21世纪，人们更加注重遗传学的发展及研究，无论是在教学上还是在科研中都有所体现。遗传学作为生物学的一个分支，其发展历史尤为悠久。其基础研究也开展得很充分，比如对经典遗传学实验——植物细胞有丝分裂观察[1]的研究，就研究得较为深入：吴会鹂研究认为大蒜是观察植物细胞有丝分裂的好材料[2]；肖桂芝通过研究也认为大蒜是观察植物细胞有丝分裂的理想材料[3]；赵建锋对观察植物细胞有丝分裂的实验进行了研究，并对此实验提出了改进意见，认为效果最好的实验材料是大蒜[4]；郁建强等人针对园林专业的特点，以水仙为材料进行有丝分裂实验，并改进了一些实验技术，证明是完全可行的[5]；李光明等人研究了四种预处理（0.05%的秋水仙素水溶液，对二氯苯饱和水溶液，0.002mol/L的8-羟基喹啉水溶液，4℃低温冷冻）对蚕豆根尖细胞有丝分裂的影响,指出不同的预处理对蚕豆根尖细胞的有丝分裂有不同的影响[6]，等等。纵观上述这些研究结果及报道，很明显的一点是：目前对于植物细胞有丝分裂观察的研究多集中在单独讨论某一特定植物材料，而少有同时讨论多种植物材料；更少有单独进行有丝分裂观察植物的培养研究，我们因而选此课题进行一定的探究。本文设计12种可控性实验条件对蚕豆、小麦、大蒜、洋葱进行培养，以期获得其生根的最佳实验室培养条件。2?材料与药品2.1?材料用具?本实验选市售大蒜、小麦、洋葱、及蚕豆（都无霉变腐烂）作为实验材料；选用壤土、砂土、壤砂混合土作为土培基质；实验用具为花盆、量筒、滴瓶、广口瓶、烧杯、培养皿、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、恒温水浴锅等。2.2?药品溶剂本实验所用药品溶剂为纯酒精、冰醋酸（分析纯）、CarnoyⅠ固定液?、醋酸洋红液?、盐酸（分析纯）、0.01g/ml龙胆紫溶液?、自来水、蒸馏水等。3?实验方法与操作3.1?根尖培养3.1.1?实验材料在土壤环境中的培养实验材料在土壤环境中的培养，按如后步骤进行：⑴?取中等大小花盆12个，编号并置于实验室窗台上（此即本实验操作过程中的温度和光照条件，在本实验中不受控，但在同一组内温度和光照条件基本一致）。⑵?分别取壤土、砂土、壤砂混合土（简称壤砂）适量装入已编号的花盆中，并松翻土壤。⑶?将材料（大蒜、小麦、洋葱、蚕豆）种入花盆中（注：蚕豆在培养前要浸泡2~3天）。⑷?然后按表1.1方案进行浇水培养（每次均匀浇水约80ml左右），观察其生根状况并作好记录。表1.1??植物材料的土培方案土壤 浇水频度 备注类型 3次/天 2次/天 1次/2天 壤土 砂土 壤砂 表2.1?　植物材料的水培方案培养容 换水频度 备注器 3次/天 2次/天 1次/2天 培养皿 3.1.2?实验材料在水环境中的培养实验材料在水环境中的培养，按如后步骤进行：⑴?取培养皿15套（分别用于培养洋葱、大蒜、小麦、蚕豆），并编号（注：蚕豆在培养前要浸泡2~3天，小麦在培养过程中要用纱布将其与水分隔）。⑵?往容器里注入适量自来水。⑶?将材料置入已编号的容器里。⑷?然后按表2.1方案进行换水培养，观察其生根状况并作好记录（注：各处理重复三次培养）。3.2?根尖材料的有丝分裂观察3.2.1?装片的制作⑴?固定??取根尖2~3mm于CarnoyⅠ固定液中固定24h。?⑵?解离??酸解法，即将固定后的材料用清水或蒸馏水洗涤后，放入1M HCL中在60℃下恒温处理5~20min，如洋葱根尖处理10min即可[10]。⑶?漂洗??待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水或蒸馏水的培养皿中漂洗约10min。⑷?染色??把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）的培养皿中，染色3~5min。除特别说明外，本实验一律用龙胆紫染色液染色。⑸?制片??用镊子将根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水或蒸馏水，并用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用母指轻轻地压载玻片，这样可以使细胞分散开来。3.2.2?装片的观察仔细观察，作好记录。4?实验数据4.1?植物材料生根数据4.1.1?植物材料的土培生根数据在不同的土壤及浇水频度培养条件下，几种植物材料的生根状况各不相同，现将其记录如后表4.1，表4.2，表4.3，表4.4。（注：蚕豆、小麦每次培养的总粒数都有为15粒，水培条件下相同。）表4.1??不同土壤及浇水频度条件??????下蚕豆的生根率土壤 浇