【毕业论文】尿素对螺旋藻生长及脲酶活力影响的研究.docVIP

【标题】尿素对螺旋藻生长及脲酶活力影响的研究 【作者】万 娟 【关键词】螺旋藻??尿素??生长量??脲酶 【指导老师】赵 昌 琼 【专业】生物科学 【正文】1??引言螺旋藻是一类多细胞、丝状、不分枝、无异型胞、缠绕成螺旋状的蓝藻，属于蓝藻门(Cyanophyta)，段殖藻目(Hormogonales)，颤藻科(Oscillatoiceae)，螺旋藻属(Spirulina)?[1]。目前国内外已发现30多种，我国有5种[2]。螺旋藻是目前世界上营养成分最多、最均衡的食品之一，其蛋白质含量高达60%—70%，含有8种必需氨基酸、丰富的维生素、不饱和脂肪酸、多糖、β-胡萝卜素和多种矿物质等，素有“微型营养库”之称[3]；具有提高机体免疫、抗衰老、抗辐射、抗癌和防癌等功效，被世界卫生组织和联合国粮农组织称为“21世纪人类最佳保健品和最理想的食品”。现已成为许多国家努力开发利用的一种新型微藻，并被广泛应用于医药保健、食品、饲料添加、水产养殖、精细化工等方面。螺旋藻的人工养殖技术已日趋成熟，许多国家和地区都开展了大规模的螺旋藻生产。我国近年来也开始了此项工作，但螺旋藻的养殖主要分布在南方和沿海地区，养殖所用的藻种基本是引进的外来品系，主要是非洲Chad湖的钝顶螺旋藻和墨西哥Sosa texcoco湖的极大螺旋藻[4]。它们适宜生长温度为28℃～35℃，属高温藻种。随着引进藻种的驯化，我国螺旋藻生产工厂虽然向北移了一些，但仍在北纬37℃以南，在我国大部分地区难以实现其商业价值。要使螺旋藻养殖地理范围由南向北发展，扩大养殖区域，必须要致力于对低温品系的开发研究。1995年，我国首次在内蒙古鄂尔多斯高原碱湖发现了一种广温品系的钝顶螺旋藻[4]，这是目前世界上发现有钝顶螺旋藻分布的第二个地区。经相关研究表明：鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻生长的温度范围为4℃～45℃，最适温度约为24℃，属于广温型的品系[5]。1997年，我国在鄂尔多斯高原巴彦卓尔湖畔建立了螺旋藻研究基地，利用该藻种和经过调试的碱湖水进行人工养殖，试养成功。该项成果于2001年实现了产业化，这结束了我国螺旋藻产业使用外来藻种的历史[6]，目前内蒙古鄂尔多斯高原螺旋藻的养殖面积已近40万m2，年产干藻粉500t左右。有关内蒙古钝顶螺旋藻的研究主要集中在生理生化方面，如：刘华等[7]比较研究了鄂尔多斯高原碱湖的螺旋藻与引进种的光合色素；栗淑媛等[8]研究了螺旋藻POD对温度和pH值的适应性；栗淑媛等[9]研究了低温胁迫对螺旋藻脱氢酶活力的影响；杨学文等[10]研究了温度对3种产业化螺旋藻生长及蛋白质含量的影响。且据研究报道，我国内蒙古鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻具有广阔的产业化前景。螺旋藻为不固氮蓝藻[11]，不能利用空气中的N2，只能利用培养基中的氮源来合成自身的营养物质。在螺旋藻培养基的各种营养元素中，氮源的种类及浓度对其生长的影响较大。因此了解和掌握不同氮源对螺旋藻生长的影响，是螺旋藻大规模养殖中提高产量和降低成本的关键。目前对于螺旋藻基本培养基中氮源的研究较少，尤其对我国内蒙古鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻的相关研究尚未见报道。本研究以我国内蒙古鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻（S1）为材料，研究不同浓度的尿素对其生长和脲酶活力的影响，并与引进种——非洲Chad湖钝顶螺旋藻（S2）和墨西哥Sosa texcoco湖极大螺旋藻（S3）进行比较，探讨适合我国广大地区螺旋藻养殖的最适藻种及其氮源和浓度，从而优化培养基配方，降低养殖成本，为我国螺旋藻资源的开发利用、优良品系的筛选及其产业化提供理论依据。2??材料、仪器与方法2.1??实验材料(表1)表1??实验材料代号 物种 产地（来源）S1 钝顶螺旋藻 鄂尔多斯高原碱湖Spirulina(Arthrospira) platensis （内蒙古农业大学）S2 钝顶螺旋藻 非洲Chad湖S.(A.) platensis （南京大学生物科学与技术系）S3 极大螺旋藻 墨西哥Sosa texcoco湖S.(A.) maxima （南京大学生物科学与技术系）注：下文样品代号以此表为标准。2.2??仪器与设备AR2140电子分析天平；U-1800紫外-可见光分光光度计；CR226高速冷冻离心机；TES-1322A照度计；PHS-25C型酸度计；DDS-11A电导率仪；BCD-218美菱冰箱；Nikon Ys100显微镜；吸样器；凯氏定氮仪等。2.3??方法2.3.1??螺旋藻的常规培养将供试的3种螺旋藻分别接种到Zarrouk培养液[12]中，在25℃、光照度为3000lx（12h/d）条件下，进行室内通气培养，光照过程中每小时搅拌1次。2.3.2??氮源处理培养以Zarrouk培养液配