【毕业论文】灰棕紫泥土反硝化酶热力学研究.docVIP

【标题】灰棕紫泥土反硝化酶热力学研究 【作者】邹璐璐 【关键词】亚硝酸还原酶??动力学参数??热力学参数??灰棕紫泥 【指导老师】李昌满 【专业】生物科学 【正文】1引言土壤酶是由微生物、动植物活体分泌及由动植物残体、遗骸分解释放于土壤中的一类具有催化能力的生物活性物质，根据作用原理可以分为水解酶类、氧化还原酶类、转移酶类、裂合酶类4大类[1]。土壤反硝化酶是属于分类名称为氧化还原酶类的一种酶，包括硝酸还原酶（NR）、亚硝酸还原酶（NiR）和氧化亚氮还原酶?(N OR)等，其中最重要的酶是硝酸还原酶和亚硝酸还原酶。硝酸还原酶、亚硝酸还原酶在缺氧条件下，还原硝酸盐，释放出分子态氮（N2）或一氧化二氮（N2O）。我国对土壤酶的研究始于20世纪60年代初期，主要研究土壤酶与土壤微生物的关系、耕作技术对土壤酶的影响及土壤酶与植物生长的关系，仅发表少量研究报告[2]。从1970年开始，土壤酶研究涉及的土壤有白浆土、黑土、棕壤、褐土、栗钙土、黑垆土、灰钙土、潮土、黄棕壤、红壤、黄壤、紫色土、石灰岩土和水稻土等十几种土壤，研究内容既联系微生物性质研究土壤酶活性，也特别注意研究一些土壤积累酶的特性，探讨了土壤酶与其它肥力因素的关系，同时用土壤酶评价农业管理措施的效果，鉴别土壤类型和肥力水平[3]。研究的土壤酶种类有过氧化氢酶、多酚氧化酶、脲酶、蛋白酶、磷酸酶、脱氢酶和蔗糖酶等。20世纪80年代中期以后，随着环境科学的发展，土壤酶对废水、废物的降解作用受到普遍关注,金属元素对土壤酶的影响也备受生态学家的重视。目前，国内对农田生态系统的土壤酶研究较多，如：与碳、氮、磷转化相关的几种土壤酶在剖面的分布特点，农业管理措施对土壤酶活性的影响及土壤酶活性与土壤其它肥力因子的相关性的研究。土壤酶在环境污染治理中的作用也进行了初步探讨，并报道了废水、废物中金属元素对土壤酶的影响[1]。含氮化合物在土壤中的转化，是土壤酶代谢的中心环节之一。它对土壤形成及整个生物圈的功能起着非常重要的作用，进入土壤和积累在土壤中的含氮有机化合物常遭到复杂的生物化学转化，最后转变成植物可以利用的形式。在土壤中存在着参与土壤氮循环的各主要阶段的所有酶类，高分子含氮有机物至硝态氮的转化以及相反的过程，不仅能在微生物细胞内进行，也能在土壤酶的作用下产生[4]。反硝化酶包括硝酸还原酶和亚硝酸还原酶，是作用于反硝化作用的酶，反硝化作用过程产生的N 0是温室气体，进入大气后增加温室效应。农业生产占人类活动对N O贡献的主要部分，而农业中N O的产生主要来自于土壤[5]。施入土壤的氮肥，主要通过氨化作用和反硝化作用损失，其中氨化作用就是微生物分解有机含氮化合物释放出氨的过程。土壤中氨化作用的强弱除与有机含氮化合物的数量有关外，还受土壤环境条件的影响。在水分适宜、通气良好的中性土壤中,氨化作用能正常进行,作用的速度随温度的升高而加强。另外,土壤中的通气状况不同,参与氨化作用的微生物种类就不同，最终产物也不一样。通气良好时，主要由好气微生物作用，最终产物为氨；在通气不良的条件下，由厌气微生物作用，最终产物为氨和胺；反硝化作用是含氮化合物在土壤中的转化途径之一，也是土壤酶代谢的中心环节之一。参与反硝化作用最重要的两种酶就是硝酸还原酶和亚硝酸还原酶，硝酸还原酶是催化 NO3-?还原为 NO2-?的专性酶，亚硝酸还原酶是催化NO2-还原为气态氮氧化物的专性酶[6]。?亚硝酸盐是反硝化过程中一个重要的支点，从这一点可转向同化性反硝化形成羟胺，再还原为氨，被植物所吸收利用，还可以转向异化性反硝化，生成一氧化二氮或者氮气。通常异化性反硝化使硝酸盐或亚硝酸盐还原成一氧化二氮和氮气，从而不但降低了土壤中氮素营养的含量，对农业生产也不利。随着世界人口的急剧增加，粮食需求不断增大，肥料农药作为农作物增收防病的主要措施而被广泛施用。我国氮肥的损失严重，利用率不足40%，较发达国家低10%。氮肥损失的主要途径是氨化和反硝化，其结果一方面是引起产品品质下降，如蔬菜中的硝态氮大量累积；另一方面是对环境质量造成威胁,??如水体富营养化等。在氮肥损失的2个生化途径中，特别值得人们关注的是反硝化过程，其产生的N2O温室效应是CO?的200倍，并且对臭氧层有破坏作用，导致 1980～1990年间地球紫外线辐射大约增强了6%。尽管施入土壤的氮素仅有0.5%～1.5%转化成N2O，但全球每年纯氮的消耗量高达 93.5×10 t，?使得N2O总量仍以每年0.25%的速率递增，其仍在不停地破坏着人类生存的环境。故近三、四十年来,土壤的反硝化问题一直是农业和环境科研工作者关注的热点问题之一[7]。2009年12月7－18日在丹麦首都哥本哈根召开了世界气候大会，目的就是商讨《京都议定书》一期承诺到期后的