【毕业论文】灰棕紫泥土脲酶热力学研究.docVIP

【标题】灰棕紫泥土脲酶热力学研究 【作者】黄 艳 【关键词】土壤脲酶?动力学参数?热力学参数?灰棕紫泥土 【指导老师】李昌满 【专业】生物科学 【正文】1?引言土壤酶是由微生物、动植物活体分泌及由动植物残体、遗骸分解释放于土壤中的一类具有催化能力的生物活性物质，根据作用原理可以分为水解酶类、氧化还原酶类、转移酶类、裂合酶类4大类[1]。土壤酶来源主要有3种途径：微生物、土壤动物、植物根系和植物残体[2]。?脲酶(Urease)是分类名称为尿素胺基水解酶的一些酶的通称。它是一种作用于线型酰胺的C-N键(非肽)的水解酶。它是存在于土壤中的生物催化剂，能将尿素水解成二氧化碳和氨[3]。我国对土壤酶的研究始于20世纪60年代初期，主要研究土壤酶与土壤微生物的关系、耕作技术对土壤酶的影响及土壤酶与植物生长的关系，仅发表少量研究报告[4]。从1970年开始，土壤酶研究涉及的土壤有白浆土、黑土、棕壤、褐土、栗钙土、黑垆土、灰钙土、潮土、黄棕壤、红壤、黄壤、紫色土、石灰岩土和水稻土等十几种土壤[5]，研究内容既联系微生物性质研究土壤酶活性，也特别注意研究一些土壤积累酶的特性，探讨了土壤酶与其它肥力因素的关系，同时用土壤酶评价农业管理措施的效果，鉴别土壤类型和肥力水平[6]。研究的土壤酶种类有过氧化氢酶、多酚氧化酶、脲酶、蛋白酶、磷酸酶、脱氢酶和蔗糖酶等。土壤微生物及其生物活性常常被作为自然和农业生态系统中土壤胁迫过程或生态恢复过程的早期敏感性指标[7、8]，尤其是80年代末以来，土壤酶作为土壤质量的生物活性指标，一直是土壤酶学的研究重点。首先指出土壤中存在脲酶的是Rotini(1935)。Conrad(1940、1941、1942)随后的开拓性工作，提供了土壤中含有脲酶的令人信服的证据。人们关于脲酶的特性的绝大部分知识，系得自对洋刀豆脲酶的研究[9]。洋刀豆脲酶被认为对尿素有绝对的专一性，并能将尿素直接水解成二氧化碳和氨[10]。大多数学者认为土壤脲酶是决定土壤中N转化的关键酶，主要来源于微生物和植物——包括活体分泌和死亡残体分解释放.?但有许多报道证明植物和微生物，对大气CO2?增加有直接的响应。相关研究表明，在大气CO2?增加时，植物生理活性发生变化、凋落物进入土壤的数量增加、土壤微生物活性增强等，这都可增加由植物和微生物分泌、二者残体分解释放的土壤脲酶数量，引起土壤脲酶活性增加。由于农业生产中广泛使用尿素，所以参与尿素水解作用的脲酶也日益为人们所重视[11]?。土壤脲酶酶促反应热力学，对了解尿素在土壤中的转化是必要的，对于揭示脲酶催化作用机理亦十分重要。目前对土壤脲酶的热力学研究主要集中研究影响脲酶活性的因素上。如: Vmax?、Vmax/ Km?、k?值、Q值、ΔS值、Ea值。和文祥、朱铭莪研究了陕西土壤脲酶热力学特征，结果表明:?土壤脲酶的Q10范围为0.82～0.248?；两阶段土壤脲酶除个别处理外Ea、ΔH1?、ΔH2?、ΔS?均大于零。揭示出形成和分解阶段酶促反应的有序性较差，混乱度较大，需要外界提供更多能量来完成酶活性部位与反应物的互补契合以及解离，最终完成酶促反应；形成阶段ΔG1和整个反应的ΔG、ΔH?均小于零，表明形成阶段和整个酶促反应为一可自发进行的放热反应，总体上不需要外界能量即可完成；热力学参数从多方面共同表征了各土样酶促反应机理上的细微差异[12]。邱莉萍、王益权进行了旱地长期培肥土壤脲酶热力学特征研究，结果表明：长期培肥增加了脲酶酶促反应的Vmax?、Vmax/ Km?和k?值；降低了Ea?、△G、△H?和△S?值，说明培肥能提高酶促反应速度、减小活化自由能、加快土壤中物质的生物循环过程[13]。王乐乐﹑聂立水进行的4种针叶林型下土壤脲酶热力学特征研究，结果表明：土壤酶促反应的Vmax值随土层深度的增加而减小，随温度的升高而增大；Km?值能在一定程度上反映土壤脲酶酶促反应的变化规律；土壤酶促反应速度常数K值和Ea值均表现出随温度和土壤深度变化而变化的规律，但变化特点因林型而异；酶促反应ΔH?和ΔG值随温度和土壤深度的变化而呈规律性变化；ΔS为负值，说明土壤脲酶酶促反应体系中有序性增大[14]。蒲小鹏，胡自治，张德罡，徐长林进行了高寒地区土壤脲酶活性与尿素用量的关系研究，结果表明:?高寒地区土壤脲酶活性处于较低水平，高寒地区土壤生化活性较低，有利于植物在较长时期内对尿素的均衡利用，从而提高尿素利用率，降低环境污染[15]。尿素是目前世界和我国农业生产中应用最为广泛、数量最多的氮肥品种，约占50%的世界氮肥生产及消费市场。普通尿素受化学和肥料学性质所限(易溶于水，易释放，易损失等)，水解、氨化、硝化耗时较短，植物氮素利用率通常低于30%，化肥利用率不足1/3，也就是说，