浅谈干细胞研究.pptVIP

细胞表面标记 胚胎干细胞：SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、 TRA-1-81、Oct4、Nanog、Sox2 等。 成体干细胞：CD133、CD34、CD29、CD44、CD90、P63、Nestin、Vimentin、CK19 等。 细胞内标志基因的表达 核型分析 分化能力检测 ①体外分化试验：在各种化学诱导剂或条件诱导液作用下，干细胞形态及表达基因会发生改变，进行相关检测。 ②体内分化试验：将一定量的干细胞注入同源动物的皮下，观察是否形成畸胎瘤，分析畸胎瘤向三个胚层的分化情况。 ③核移植检测：将培养的干细胞作为核供体注入去核卵母细胞中，观察重构胚是否正常发育。 ④嵌合体形成检测：将培养的干细胞与受体胚胎结合并移植入同期假孕受体，干细胞可参与受体胚胎的发育从而得到嵌合体动物，然后通过毛色判断，或同工酶检测。 体外分化 体内分化 注射干细胞裸鼠 神经丛 腺体 骨骼肌 血管 软骨 核移植 制备嵌合体 干细胞的体外定向诱导分化 　　 胎牛血清，骨髓基质细胞共培养 干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?造血细胞 　　　 RA 干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?神经细胞 　　　　　　 DMSO 干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?肌肉细胞 　　　　 TGF-B1, VEGF, bFGF 干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?血管和内皮细胞 　　　　　 RA+胰岛素 干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?脂肪细胞 　　　　　 BMP-2, BMP-4 干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?软骨细胞 　　　　 地塞米松，磷酸甘油 干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?骨细胞 　　　　 BTC，Ex4，NIC 干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?胰岛素分泌细胞 诱导多能干细胞 2006年，Takahashi等通过巧妙的实验设计，从24 个候基因中筛选出4 个与胚胎干细胞多能性更为密切相关的基因––Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4，并将它们导入到小鼠胚胎成纤维细胞和鼠尾成纤维细胞，成功地将其重编程为具有胚胎干细胞多能性的细胞––诱导多能干细胞 (induced pluripotent stem cell, iPS cell) 诱导性多能干细胞(iPS cells) 定义： iPS cells是通过基因转染技术将某些转录因子导入动物或人的体细胞, 使体细胞被重新编程成为胚胎干细胞样的多潜能细胞。 iPS 技术不使用胚胎细胞或卵细胞，因此没有伦理学的问题。 利用 iPS 技术可以用病人自己的体细胞制备专用的干细胞，不会有免疫排斥的问题。 ips优点 新方向 诱导方法：（1）不转基因而加入蛋白 （2）小分子化合物 ips机制的研究，主要是表观遗传学方面机制的研究 ips模型的建立，目前已有的模型为猪、鼠、人的干细胞模型，下一步将扩展为猴子、大熊猫等动物。 应用生命科学和工程学的原理和方法，研究、开发用于组织和器官修复、替换或增进其功能的生物替代品的一门学科。 组织工程 （Tissue Engineering) 组织工程的基本要素 细胞(Cell) －增殖、分化、自组装成组织和器官 生长因子(Growth factor) －调节细胞的增殖和分化 胞外基质（Extracellular matrix, ECM) －支撑和指导细胞增殖、分化 细胞 生长因子 生物材料 体外长成组织器官后在进行移植 干细胞研究的应用前景 研究哺乳动物个体发生发育规律 研究细胞分化 研究基因功能 生产转基因动物 疾病治疗与治疗性克隆 研究细胞癌变机理及新药物的筛选 用干细胞培育出卵子 美国生殖专家曾在2003年从小鼠身上的胚胎干细胞分化出卵子与囊胚，