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第八章 化学生态学方法简介 一 技术和方法在化学生态学中的意义 二 化学生态学研究的基本程序 三 化学生态学研究常用技术概述 四 DPS数据处理系统 一 技术和方法在化学生态学中的意义 化学生态学是一门实验性特别强的学科,技术和方法掌握尤其重要。 需要注意的是,化学生态学是化学和生物学的交叉学科,涉及化学分析和生物学两个方面的知识和技术,需要化学家和生物学家的通力配合。在实际工作中,化学家需要了解生物学的知识,生物学家需要具备一些化学背景,但是,一个人不可能全部精通两门科学的技术和方法,这就要合作和配合。 信息化学物质的数量从几百个分子到几微克,这些信息化学物质远远低于人类的嗅觉能够感受的水平。因此,我们对生物间化学联系机制的认识,在很大程度上依赖于技术水平。短短几十年的时间,化学分析的精度提高了4~6个数量级。 二 化学生态学研究的基本程序 1) 田间或野外观察 2) 实验室培养观察 3) 生物测定方法的设计 4) 信息化学物质(化感物质)的提取 5)信息化学物质的化感作用 6)提取物(化感物质)的化学分析 7) 化学成分的筛选 8) 对所测定的化合物的化学结构进行推测,然后进行合成。 9) 对合成的化合物和提取的成分进行化感作用比较 10)田间实验 三 化学生态学研究常用技术概述 1、生物测定方法 (1)风洞 用于研究飞行昆虫对挥发性活性化学物质的行为反应和飞行轨迹。可与摄像机和计算机相结合,进行行为和飞行轨迹的分析处理。 (2)嗅觉仪 用于观察飞行昆虫和步行昆虫对挥发性化学物质的嗅觉定向和行为反应,设计简单、造价低廉、使用方便。 (3)叶碟法 用于测定植食性昆虫对非挥发性化学物质的取食反应,特别用于进行拒食剂的实验。 2 电生理学方法 昆虫的触角是昆虫的重要组成部分,不仅在生理结构上有着不可替代的作用,同时再其美观性上也是不可或缺的一部分。 昆虫的触角主要功能是嗅觉、触觉与听觉,在昆虫的种间和种内化学通讯、声音通讯起着重要作用。 1)触角电位仪(EAG) 用于测定昆虫触角对挥发性化学物质的生理反应,是化学生态学研究中常用的工具,还可以使用该技术研究触角的单个化学感受器类型,这称为单细胞记录。 3 化学分析方法 1、样品制备 1)概述 在化学物质的制备过程中,需要注意八点: 第一 天然化学物质稳定性各不相同,多数稳定性差,必须有一些减少降解的特殊方法。 第二 在一次提取或分离中,很难得到足够数量的目的化合物,要反复比较和尝试各类方法步骤、从中选最佳方法。 第三 一定要防止对提取物质的污染。 2 )样品收集方法 (1)顶空收集法 将生物材料放入封闭的容器中,用注射器抽取容器内的空气(为100~1000ul),然后缓慢进样到GC中。只适合收集浓度和蒸气压高的样品,一次收集至少能达到纳克级水平的数量 。 例如用于收集挥发非常强的化学物质,乙烯、CO2等。 (2)吸附剂收集法 吸附剂收集的样品可以直接做分析,也可以用于生物测定等,这是与顶空收集和热吸附收集的不同之处。吸附剂可以用活性炭(40—80 目)等,将颗粒状的吸附剂装入短的玻璃管或塑料管(直径4mm左右)内,两头用玻璃纤维封堵。 2 气相色谱 1)简介 气相色谱(GC)是色谱法的一种,以气体做流动相,以固体或液体做固定相,以对化合物分离并进行定性和定量分析。目前色谱已经发展成为多种检测器并用、与计算机结合的自动化和智能化的分析手段。 在化学生态学中,气相色谱主要用于分析挥发性的化学物质,而对于非挥发性的化合物,需要将它们转化成相应的衍生物或者裂解为小分子,才能进行分析 。 2)基本原理 利用混合物各组分在不同的两相中的溶解-解析、吸附-脱附或其他亲和作用的差异,当两相做相对运动时,各组分在两相中反复受到上述各种作用力的影响,而使之相互分离。 容易溶于固定相的组分在固定相中停留的时间长些,移动的速度就慢些,而不易溶于固定相的组分移动速度就快些。原来混合均匀的组分就彼此发生了分离。被分离的组分按先后顺序进入检测器,在那里各组分的物理或化学变化转换成电压或电流的变化,并用记录仪将这些变化记录成色谱图。 3)气相色谱柱固定相简介 毛细管色谱柱最常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇,另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石(例如氧化铝、分子筛等)。 ① 聚硅氧烷??? 聚硅氧烷由于其用途广泛、性能稳定性,是目前最常用的固定相。标准
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