联用技术研究生物体中硒化学种态的发展趋势.pdfVIP

第26卷，第12期 光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vol.26,No.12,pp2354-2359 2006年 12月 SpectroscopyandSpectralAnalysis December,2006 联用技术研究生物体中硒化学种态的发展趋势 喻宏伟，陈春英 ‘，高愈希，柴之芳 中国科学院高能物理研究所核分析技术重点实验室，北京 100049 摘 要 环境和生物体中硒的含量极低，化学种态 Chemicalspecies 非常复杂，使其种态分析十分困难。如 何选择性测定元素硒的特定种态，从而更好地理解它在体内的代谢以及在生理学、毒理学、营养学、临床化 学等方面的重要意义是非常具有挑战性的工作，这些都依赖于现代分析技术的发展。文章重点评述了现代 联用技术的现状和发展趋势，尤其是适用于元素物种选择性测定的分离方法和检测硒化合物的鉴定方法。 主题词 硒;种态分析;元素选择性检测;联用技术;高效液相色谱一电感祸合等离子体一质谱法 中图分类号:0657 文献标识码:A 文章编号:1000-0593 2006 12-2354-06 氧蛋白还原酶 TR C5.7〕实现的。硒的抗癌、化学防护作用则 引 言 主要与无机硒盐、硒代氨基酸及其他的硒有机小分子化合物 例如单甲基化的硒，即甲基硒化氢 CH3SeH 相关[s 。表1 微量元素的生物学功能与其化学种态紧密相关，所以对 列出了体内硒化合物代谢的主要途径和代谢产物，含量极 体内组织中元素的总量分析并不足以准确评价其营养状态、 低，对分析的灵敏度和精确度要求很高[191。在哺乳动物中已 说明其与健康的关系 有益或有害 。为了更准确地揭示特定 发现至少有35种硒蛋白或含硒蛋白[[s.10，硒蛋白中硒以硒 元素对生物体的作用，有必要明确目标元素在体内的不同种 代半胧氨酸残基形式存在，其中生理功能比较明确的包括 态以及各种种态的含量川。确定样品中元素的一种或多种化 GSH-Px，脱碘酶，TR，硒磷脂合成酶， 精子 线粒体膜硒 学种态的定性和定量分析，通常称为种态分析 Speciationa- 蛋白，精子DNA结合硒蛋白，前列腺上皮硒蛋白，硒蛋白 nalysis E23。种态分析较总量分析复杂得多，除弄清元素价态 P，硒蛋白W,18kD硒蛋白等。 外，还要区分有机态和无机态、离子态和非离子态，以及与 肤或蛋白的结合或鳌合等不同种态结构信息。因此，种态分 1硒的种态分析 析对分离、分析方法提出了分辨率和灵敏度的双重要求，需 要一种可行的在线分析方法以同时获得复杂样品中化合物的 对实际样品中硒的特定种态进行分析，可利用该种态的 性质和含量信息。现代分析技术的发展，使得样品的分离效 特异性反应来实现，但需要足够量的已分离的同种硒蛋白用 率大大提高，同时，先进的检测器除可以极高的灵敏度检测 于生产抗体，采用放射性免疫法 RIA 分析特异性硒蛋白， 被测物质的含量以外，、还可以给出一些结构、功能等方面的 检出限较差[[11]。如果要对样品中的多种含硒分子同时进行 信息。联用技术将两个相对独立的分析仪器系统结合起来， 分析，则需使各种硒化合物在分析前实现时间和空间上的完 同时具备高效的分离效果和灵敏的检测手段，近年来已被广 全分离，即联合使用电泳或色谱等高分辨分离技术和原子光 泛应用于生物和环境样品中金属和非金属的种态分析3-〔5] 谱或荧光等高灵敏度硒检测方法。这种联用既可以是离线分 硒作为一种重要的必需微量营养元素，具有较好防癌、 析，如十二烷基硫酸钠一聚丙烯酞胺凝胶电泳 SDS 抗氧化等生物学作用。鉴于硒的生物效应、代谢行为和生物 与柱前衍生高效液相色谱分离荧光检测12〔-14]、放射自显 利用率在很大程度上取决于其化学种态，因此硒的种态分析 影[[15]、仪器中子活化分析 INAA ,氢化物原子荧光法结合 非常重要。生物体中硒的存在形式有:中性和离子形态的无 HGAFS 、同步辐射X射线荧光联用