胞内游离钙离子对牛卵母细胞体外老化的影响.docVIP

  胞内游离钙离子对牛卵母细胞体外老化的 影响# 鲍忠剑，曾申明** 5 10 15 20 25 30 （中国农业大学动物科技学院，北京 100193） 摘要：受精后发育潜力的降低是卵子老化的显著特征之一。本实验发现：随着牛卵子体外老 化时间的延长（6 h，12 h，和 24 h），其发育潜能逐渐降低（卵裂率和囊胚率，p 0.05）。 去除老化培养液中的钙离子能降低牛卵子胞内游离钙离子水平（p 0.05）并且延缓卵子体 外老化（p 0.05）。BAPTA-AM 作为胞内钙离子游离螯合剂，它能降低老化 12 h 老化卵 子内游离钙离子水平（p 0.05），并提高其孤雌激活胚胎的囊胚率（p 0.05）。因此，我 们得出结论：胞质内游离钙离子水平的升高是牛卵子的体外老化的主要诱因之一，降低胞内 游离钙离子的水平能延缓牛卵子的体外老化。 关键词：牛；卵子体外老化；钙离子；BAPTA-AM 中图分类号：S814.8 Effect of intracellular free calcium on bovine oocyte aging BAO Zhongjian, ZENG Shenming (College of Animal Science and Technology, China Agricultural University, Beijing 100193) Abstract: The decline of developmental potentiality of fertilized oocyte is one significant characteristic of oocyte aging. In this study, we found that the developmental potentiality of bovine oocyte declines with the elongation of aging time (6 h, 12 h and 24 h; rate of cleavage and blastocyst, p0.05). When bovine oocytes aged in calcium -free medium, the level of intracellular free calcium declined (p0.05) and aging of bovine oocyte delayed in vitro (p0.05). As the chelator of intracellular free calcium , BAPTA-AM could reduce cytoplasmic free calcium level of bovine oocytes aging for 12 h in vitro (p0.05) and increase blastocyst rate of parthenogenetic embryo (p 0.05) . It showed that the increase of cytoplasmic free calcium level is one of main inducement of bovine oocytes aging in vitro, and bovine oocyte aging can be delayed by reducing the level of intracellular free calcium in oocyte cytoplasm. Key words: bovine ,bovine oocyte aging in vitro, calcium, BAPTA-AM 0 引言 卵子体外老化是指卵子在体外培养液的环境下停留相对长的时间而引发的老化过程钙 离子。在老化过程中卵子内发生大量的分子事件，其中涉及到胞内钙离子的稳态发生变化， 35 MPF 和 MAPK 活性降低，发育潜力降低等现象 [1] 钙离子的异常主要表现在以下几个方面：首先，老化的卵子经过凋亡信号刺激后，也会造成 类似于受精过程中的胞内游离钙离子水平的增加 [2, 3] 幅和持续的时间降低。因此，钙离子参与了卵子的老化 [4] 。但是，胞内游离的钙离子变化 对卵子老化的作用还尚未报道。因此，本研究通过去除培养液中的钙离子和利用 BAPTA-AM 40 螯合胞质内游离钙离子降低卵子内钙离子水平，检测其对牛卵子体外老化的影响。 基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金资助课题(20090008110002) 作者简介：鲍忠剑（1982-），男，博士，胚胎生物工程和配子生物技术 通信联系人：曾申明（1968