趋化因子受体CXCR3在神经病理疼痛调控中的作用以及与小胶质细胞活化的关系.docVIP

  趋化因子受体 CXCR3 在神经病理疼痛调控 中的作用以及与小胶质细胞活化的关系# 谭雍慧1，李锴1,3，茅建仁2，傅开元1** 5 10 15 20 25 （1. 北京大学口腔医院颞下颌关节病口颌面疼痛诊治中心，北京 100081； 2. 哈佛大学医学院附属麻省总医院疼痛研究中心，波士顿，美国 02114； 3. 北京大学口腔医院综合二科，北京 100081） 摘要：目的：检测坐骨神经慢性压迫（CCI）术后 C57BL/6J 小鼠脊髓趋化因子受体 CXCR3 蛋白水平的变化。比较 CXCR3 基因敲除小鼠与同源野生型 C57BL/6J 小鼠在分别实施神经 损伤手术后不同时间点机械痛敏和热敏的差异，并检测脊髓背胶小胶质细胞活化以及疼痛相 关分子表达的差异性。探讨 CXCR3 在神经病理性疼痛中的作用及可能机制。方法：将 20 只雄性成年 CXCR3 基因敲除小鼠与 35 只野生型 C57BL/6J 小鼠分别随机分为 2 组，一组作 为 sham 假手术对照，另外一组为 CCI 手术组；野生手术组 22 只，野生假手术组 13 只，基 因敲除两组各 10 只。手术组以 4.0 可吸收羊肠线结扎右侧坐骨神经，假手术组大鼠仅暴露 右侧坐骨神经，不结扎。四组各取 7 只分别于术前及术后第 1、3、7、10、14 天测量左、右 爪机械和热痛阈。野生手术组分别于术后 1、3、7、14 天与野生假手术组术后第 7 天各取 3 只处死，取 L4~6 节段脊髓进行 Western blot 检测 CXCR3 的表达；各组剩余的 3 只在术后第 7 天处死，取 L4~6 节段脊髓采用免疫荧光法检测脊髓背角 iba1 和 p-p38 的表达。结果：（1） 坐骨神经慢性压迫（CCI）术后 3 天、7 天和 14 天 L4~6 节段脊髓 CXCR3 蛋白水平表达升 高；（2）术后第 1、3 天，野生手术组小鼠开始出现明显机械痛敏，然而基因敲除小鼠机械 敏感于术后第 7 天才开始出现；（3）与野生小鼠相比，CXCR3 基因敲除使热敏阈值升高； （4）免疫荧光染色显示 CXCR3 基因敲除明显抑制神经损伤后 iba1 和 p-p38 的表达上调。 结论：本研究确认了疼痛模型中脊髓 CXCR3 蛋白水平表达的增加；CXCR3 基因敲除小鼠 对 CCI 手术引起的可产生神经病理性疼痛的两种刺激耐受性均增加，即不仅延迟了机械痛 敏的出现，对热敏性疼痛也有抑制作用；CXCR3 基因敲除不但改变小胶质细胞表面标记物 iba1 的表达，同时也抑制了与小胶质细胞功能密切相关的 p-p38 的表达，因此推测，CXCR3 也可能是小胶质细胞参与疼痛的关键受体，其途径可能与 MAPK 家族通路有关。 关键词：慢性疼痛；神经病理痛；小胶质细胞；趋化因子；免疫分子 中图分类号：R338 30 The role of CXCR3 in neuropathic pain and its relationship with microglia TAN Yonghui1, LI Kai1,3, MAO Jianren2, FU Kanyuan1 (1. Center for TMD and Orofacial Pain, Peking University School and Hospital of Stomatology, 35 40 Beijing 100081; 2. MGH Center for Translational Pain Research,Harvard Medical School,Boston, MA, US 02114; 3. Department of Ceneral Dentistry II, Peking University School and Hospital of Stomatology, Beijing 100081) Abstract: Objective： CXCR3 was rarely mentioned in the mechanisms of pain modulation. Our previous study demonstrated that mRNA of CXCR3 was significantly induced in the spinal cord by peripheral formalin injury. The present study is to investigate the possible involvement of CXCR3 in neuropathic pain. Methods：Twenty adult male CXCR3 deficient mice and Thir