植物组织培养课件.ppt

* 组长：秦彤 组员：牛辉 车延 黄楠 宋丽萍 园林绿化植物的 组织培养及研究进展 研究题目 研究简史 230年前Henri-Louis Duhamel du Monceau 进行了植物伤口愈合的实验 1902年德国植物学家Gottlieb Haber- landt提出了离体细胞培养概念 离体培养理论被证实后不久， 植物学家致力于推动实际应用 现今植物组织培养技术已有广泛应用 木本植物的器官发生植株再生途径可分为两类： 一是先从外植体上诱导出愈伤组织， 再从愈伤组织上诱导出不定芽或不定根原基的间接器官发生过程，包括从愈伤组织或悬浮培养的细胞和原生质体再生植株； 二是不经过愈伤组织阶段， 直接从原始外植体上诱导产生不定芽或不定根的直接器官发生。 研究现状 松树 云杉 杨树 榆树 泡桐 刺槐 悬铃木 毛白杨 休眠芽 材料类别 培养条件 启动培养基 MS+BA 0.5mg/L+水解乳蛋白100mg/L 增值培养基 MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.02mg/L+赖氨酸100mg/L， 用2%果胶替代蔗糖 组织培养技术—毛白杨 直径5mm左右的枝条 长度为1.5~2.0的节段(每个节段带1个休眠芽) 剪切 用70%酒精消毒约30s 用无菌水冲洗 5%次氯酸钠溶液消毒7~8min 无菌水冲洗三四次 剥取茎尖(每瓶只接种一个茎尖) 启动培养基培养5~6天后 正式诱导分化的培养基上 分化出芽 培养室温度25℃~27℃, 日光灯连续光 关照强度为1000lx， 经2~3个月培养 组织培养技术—毛白杨 茶条槭 材料类别 培养条件 材料类别嫩茎段 启动培养基：木本培养基+6-BA1.0?mg/L +3％蔗糖+0.5%琼脂pH5.8； 增殖和生根培养基：木本培养基+IBA?0.1mg/L+3％蔗糖+0.5%琼脂pH?5.8。 培养温度为(25±2)℃，光照时间12?h/d，光强为40μmol/(m2·s) 组织培养技术—茶条槭 取幼嫩枝条做外植体 去掉叶片(仅顶部1—2片叶) 剪取外植体 刷洗外植体 自来水淋洗30min 用70％酒精处理30?s 0.1％的HgCl，浸泡8?min 用无菌水冲洗5、6次 植体切成1.0~1.5?cm长的带芽茎段或茎尖(带1～2片叶) 接种在启动培养基上 茶条槭---无菌材料的获得 接种在启动培养基上的茎段7?d后， 腋芽开始萌动，25?d后，腋芽伸长1～3?cm。 茶条槭---启动培养 新梢剪成带1个节的茎段 插入增殖和生根培养基中 茎段基部产生少量愈伤组织 形成根系 抽茎 小苗 部分转入培养基(2)中 每个芽1个月可增殖3倍以上 茶条槭---芽的增殖及生根 将培养30?d左右的生根苗移入温室，闭瓶炼苗4—5?d，松口炼苗l一2?d， 然后洗去附着在根部的培养基，定植在革炭基质中并浇透水。 盖膜保湿，适当遮荫，10?d后有新根长出，成活率为90％左右。 茶条槭---生根苗的移栽 红叶樱花 材料类别 培养条件 嫩茎段 启动培养基：MS+3％蔗糖； 增殖培养基：改良MS+6-BA 0.3～1.0 mg/L+3％~4％蔗糖+0.5％ 琼脂，pH 5.8； 生根培养基：1/2MS+IBA 0.05~ 0.5 mg/L +NAA 0.05-0.5+2％蔗 糖+0.5％琼脂，pH 5.8。 培养温度为(25±2)℃，光照时间为12h/d，光照强度为 54μmol/(m2·s)。 组织培养技术---红叶樱花 幼嫩枝条做外植体 枝条带芽茎段 刷洗茎段 自来水冲洗30 min 用75％酒精处理30 S l％的NaCIO浸泡10 min 无菌水冲洗一遍 用0．5％的NaCIO浸泡 无菌水冲洗3~4次 将外植体接种在启动培养基(1)上 萌动成苗 红叶樱花---无菌材料的获得 将启动培养获得的苗切割下来，转入增殖培养基(2)中，7 d后芽萌动发出新叶， 茎基部膨大，15 d后开始有丛芽形成，25-30 d为一个继代周期。 将切割小苗反复转入新鲜的培养基(2)中。 将高度超过1．5 cm的小苗切下，插入生根培养基(3)中，6～8 d后开始生根， 露出白色根尖，随后根逐渐生长，20 d就可以形成完整根系，生根率达到100％。 红叶樱花---芽的增殖及生根培养 将已经生根的植株移入温窜，闭瓶炼苗4d后，松口炼苗ld。 然后洗去附着在根部的培养基，定植在蛭石和草炭1：l混合基质中。 7 d后逐渐揭膜通风，14 d后有新根长出，45 d后成活率可达91％。 红叶樱花---炼苗与移栽 粉叶复叶槭 材料类别 培养条件 嫩茎段。 启动培养基：WPM+6-BA