不同方式生产马铃薯微型薯机理研究测定指标.docVIP

不同方式生产马铃薯微型薯结薯机理研究 吕树鸣 迄今为止，有关马铃薯结薯机理研究多是在离体试管繁殖薯中进行，很少有不同离体途径结薯的机理研究，且大多以单个因素的作用解释马铃薯结薯机理，其机理研究的结果也存在巨大差异，不能清楚地分辨何种或几种生理因素的关键作用。因此，迫切需要从结薯性能入手系统研究并比较不同微型薯繁育方式下的生理反应，不仅在理论上可以系统地得出马铃薯的结薯生理表达机理，而且可以在实践上筛选一种微型薯繁育的最佳方式，实施品种选育和微型薯繁育的生理调控。 第一部份 试验设计方案 1试验处理因素和水平设计 因素1A: 何庆学配方液A1 王络彩配方液A2 杨元军配方液A3 因素2B: 夏波蒂B1、凉薯97B2、高原7号B3、鄂薯3号B4 采用二因素裂区试验进行研究.主处理为A,设A1、A2、A3三个水平，副处理为B,设B1、B2、B3、B4四个水平，其田间排列列于图1 有土栽培 A1 A2 A3 B2 B1 B3 B4 B4 B1 B3 B2 B3 B1 B4 B2 无土栽培 A2 A3 A1 B2 B4 B3 B1 B3 B2 B4 B1 B4 B1 B2 B3 雾化栽培 A3 A2 A1 B3 B2 B1 B4 B3 B2 B4 B1 B3 B4 B1 B2 图1马铃薯营养液与品种裂区试验田间排列和小区产量 其中：有土栽培小区面积0.5×1.5m2,行窝距10×7cm,每小区5行,每行16株,共80株 无土栽培小区面积1.35×1.3m2,行窝距15×10cm,每小区8行,每行14穴,共112株. . 雾化栽培小区面积 ，行窝距10×5cm,每小区11行,每行12株,共132株. 2、试验设计的具体环节和实施的保证方法 2.1寄栽生根培养 9月22日～28日当试管苗长到6~8cm壮苗时,用20mg/gIBA生根剂浸根20min,以5cm×2cm的株行距寄栽到无土基质中促进生根, 寄栽７d后，脱毒试管苗就长出新根，理想的株型为:叶片较大，叶色深绿，茎秆健壮。 3.2定植 定植前对营养液，设备及工具进行消毒处理。生出新根后9月26日将脱毒苗按15cm×10cm的株行距分别定植到土壤、无土基质和雾化槽板上。采用适宜的栽培管理措施，并做好晚疫病防治工作。 3.3定植后的管理 定植后马上浇定根水,以后视气候情况用清水喷施,保持土壤湿润,湿度70%~80%。重庆气候早秋气温较高，加盖遮阳网保持温度18oC~22C. 2d以后用营养液浓度的1/3～1/2倍液喷雾，7d后改为正常浓度，营养液每隔4天浇施一次，保证植株正常生长。 第二部分 研究结薯能力与激素种类和含量的相关关系 研究激素对块茎形成影响的报告很多，但结果都不太一致，作用机理也不十分清楚，通过对不同激素在马铃薯发育关键时期的存在情况和和活性变化，测定各种离体结薯途径在块茎形成前、形成中及形成后激素存在种类及量的变化，试图寻求一个影响结薯的主要因素及各种激素对结薯的综合影响。 1 测定参数(取样时间：葡萄茎发生盛期和块茎形成盛期两次；取样部位：第一次植株地上部，第二次也取植株地上部；取样量：每个处理1g，0.5g/包 IAA ABA JA 6-BA GA 2测定方法 酶联免疫法（ELISA）测定内源植物激素 一 基本原理 ELISA是建立在两个重要的生物化学反应基础之上的，即（1）抗原抗体反应的高度专一性和敏感性；（2）酶的高效催化特性。ELISA把这二者有机地结合在一起，即被分析物先与其相应的抗体或抗原反应，然后再检测抗体或抗原上酶标记物的活性，从而达到定性或定量测定的目的。 ELISA可分为两大类，即固相抗体型（直接法）和固相抗原型（间接法）。直接法是利用游离抗原和酶标抗原与吸附抗体的竞争性结合反应；间接法――本文所采取的方法，则是利用游离抗原和吸附抗原与游离抗体的竞争性结合反应，它的原理可用下式表示： Ab＋H＋HP→Ab＋AbHP 其中Ab表示抗体，H表示游离激素，HP表示吸附在板上的激素－蛋白质复合物。根据质量作用定律，当该反应体系中Ab及HP的量确定时，游离H越多，结合物AbH形成的就越多，而AbHP形成的就越少，即结合在板上的抗体就越少，通过酶标二抗检测结合物AbHP的多少，就抗原确定游离H量的多少。 二 样品处理 样品处理对ELISA测定是非常关键的，否则会浪费药品。 1 取样时间和取样部位 取样时间选在葡萄茎发生盛期（10月10日～14日，）、块茎形成盛期（10月20日~10月24日）两次。 第一次取样只取地上部分植株(包括叶和茎),1g一个包