二氧化硫对大麦幼苗的氧化损伤效应.docVIP

二氧化硫对大麦幼苗的氧化损伤效应 仪慧兰，李秀娟，刘静 山西大学生命科学与技术学院，山西 太原 030006 以大麦（Hordeum vulgare L.）为材料，研究SO2水合物NaHSO3-Na2SO3混合液（13，mmol · L-1: mmol · L-1）对大麦幼苗的氧化损伤效应。结果表明，大麦幼苗的生长受SO2水合物浓度和作用时间的影响，低浓度促进幼苗生长，高浓度抑制生长，抑制效应随作用时间的延长而增强；在胁迫6 d后，大麦叶组织中的超和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性增高，还原型谷胱甘肽（GSH）含量上升。加入外源抗氧化剂抗坏血酸（AsA）后，SO2水合物对大麦幼苗生长的抑制效应得到缓解，膜脂过氧化产物丙二醛（MDA）含量降低。研究结果表明：SO2水合物处理能引起大麦幼苗氧化胁迫，诱导抗氧化酶表达增强、活性氧清除能力提高，但活性氧的增加又会引起细胞氧化损伤，SO2对植物的伤害与其对细胞的氧化损伤有关。 二氧化硫；大麦；氧化胁迫中图分类号：X171.5 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（200）0-1442-04硫是植物必需的元素，二氧化硫（SO2）能，环境中高浓度的SO2能，影响植物的生长发育[1,2]。研究表明，SO2进入植物体后在细胞内首先转化为HSO3-和SO32-，之后SO32-被氧化成SO42-，在此氧化过程中产生活性氧，如·OH，O2-·和H2O2等[3]。生理条件下，植物体内具有一定的保护系统，如酶系统的超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和CAT），非酶系统的谷胱甘肽（GSH）、抗坏血酸（AsA）等，它们协同作用使细胞内的活性氧自由基维持在一定水平，维持细胞正常的结构和功能[4]。逆境胁迫时，细胞的抗氧化系统会发生适应性改变，以提高对活性氧的防护作用；但若胞内产生了过多的活性氧自由基，就会对细胞产生一系列毒害作用。多数学者认为，SO2对植物的伤害与活性氧有关，但到目前为止，有关SO2伤害机理缺乏直接的实验证据。 本文根据SO2进入生物体后以它的水合物NaHSO3-Na2SO3(1:3，mmol· L-1：mmol· L-1)的形式对生物体产生作用的事实[5]，研究其对敏感植物大麦幼苗的氧化胁迫效应，为SO2毒性机理提供实验依据。 大麦(Hordeum vulgare L.)为“晋科571”。 种子用10%的NaClO浸泡0.5 h，蒸馏水冲洗，浸种3 h后用湿纱布包裹，25 ℃暗培养。待种子露白后，采用滤纸法发芽，水培24 h后用于实验。 取生长均匀一致的幼苗随机分组。SO2处理组采用NaHSO3-Na2SO3混合液（1:3，mmol· L-1mmol· L-1）培养，浓度分别为0.1、0.5、2.5和10.0 mmol· L-1（以Na2SO3浓度计）。对照组用蒸馏水培养。抗坏血酸（AsA）缓解组选水培5 d的幼苗，用10 mg· L-1 AsA预处理2.5 h后，10 mmol· L-1的NaHSO3-Na2SO3混合液处理12 h，设同期的AsA、SO2水合物及水对照组。12 h换1次新处理液，每处理设3个重复组。处理结束后测量每组20株幼苗的株高、根长及叶片MDA含量。 处理6 d后取幼叶提取酶液。；CAT紫外吸收[7]；Flohé和Günzler的GSH含量测定参照E11man的方法[9]丙二醛（MDA）含量测定采用硫代巴比妥酸（TAB）显色法[6]。蛋白质含量的测定采用考马斯亮蓝G-250染色法[6]159-160，用牛血清白蛋白做标准曲线。 计算每个处理3个重复组的平均值和标准误，方差分析后采用Duncan法进行处理组与对照组之间的比较，差异显著性表示：*为P0.05；**P0.01。 SO2水合物对大麦幼苗生长发育的影响依赖于浓度和处理时间（图1）。处理6 d后，0.1 mmol· L-1组幼根最长，浓度大于0.5 mmol·L-1的组根和芽生长抑制；随处理时间延长，处理和对照组间的生长差异增大，不同浓度SO2处理均表现对根生长的抑制，但0.1 mmol· L-1和0.5 mmol· L-1处理能促进芽的生长。对根和芽生长效应的差异可能是因为根部直接暴露于处理液中，而根部吸收的亚硫酸根往上部转移的量较少引起的。处理6 d后对照组芽最长，说明SO2水合物对芽的萌生具有抑制作用；但硫是植物必须元素，低浓度硫能促进芽的生长，所以8 d后0.1 mmol· L-1和0.5 mmol· L-1组的株高超过了对照组。 图1 SO2水合物对大麦幼苗根长和芽长的影响 Fig.1 Effect of sulfur dioxide hydrates on the length of roots