原创力文档- 1、本文档共9页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
11 1
农业生物技术学报， 年， 第 卷， 第 期， 第 页
2011 19 6 1127~1135
JournalofAgriculturalBiotechnology,2011,Vol.19,No.6,1127~1135
研究报告
ALetter
草酸青霉外切葡聚糖酶基因 cbh1 克隆及其在毕赤酵母中的表达和重组
( )
外切葡聚糖酶特性分析
赵萱 1,2 1* 3 1 1,2 2 1 1
顿宝庆 顾金刚 王智 田谷 许修宏 路明 李桂英
1 100081 2
中国农业科学院作物科学研究所， 国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程， 中国农业科学院生物质能源研究中心， 北京 ； 东
北农业大学生命科学学院， 哈尔滨 150030 3 100081
； 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所， 中国农业微生物菌种保藏管理中心， 北京
* baoqingdun9@
通讯作者，
摘 要 木霉的纤维素酶系中通常缺少 茁 葡萄糖苷酶， 导致了终产物抑制， 木霉生长速度明显没有青霉快，
因此， 来源于青霉的纤维素酶受到了越来越多的重视。通过热不对称交错 PCR(TAILPCR)技术从草酸青霉
(Penicillium oxalicum)M菌株中克隆得到外切葡聚糖酶基因 cbh1(GenBank 登录号:HQ843504)。该基因全长
为 ， 无内含子序列， 编码 个氨基酸， 具有 ， 和 典型催化残基， 推测属于糖
1641bp 547 Glu236 Asp238 Glu241
基水解酶第 7 家族。将 cbh1 克隆到毕赤酵母表达载体 pPIC9 中， 构建重组表达质粒 pPIC9cbh1 ， 电击转入
毕赤酵母(Pichia pastoris )GS115 菌株。阳性重组子经测序及活性分析表明，cbh1 基因成功分泌表达， 表明来
源于草酸青霉的外切葡聚糖酶基因首次在毕赤酵母中获得成功表达。重组酶活性分析表明， 其活性可达 56
， 最适反应 、 温度分别为 和 ， 且 和温度稳定性均较好。研究结果认为，cbh1 基因的克隆
IU/mg pH 6.0 55℃ pH
丰富了纤维素酶的基因资源， 其在毕赤酵母中的成功表达也为该类纤维素酶基因高效工程菌株的构建提供
了基础。
关键词 外切葡聚糖酶， 毕赤酵母， 表达， 酶学性质
茁 cbh1 Penicillium
Cloning of an exo 1,4Dglucanases Gene ( ) f
文档评论（0）