蔺草品种间DNA指纹鉴定技术研究初报.pdfVIP

　　2006 年第 3 期 309　　 蔺草品种间DNA 指纹鉴定技术研究初报 1 2 1 , 2 1 李礼君 , 舒小丽 , 王忠华 , 沈伟其 ( 1 浙江万里学院 生物技术研究所 , 浙江 宁波 　315100 ; 2 浙江大学 原子核农业科学研究所 , 浙江 杭州 　310029) ( ) 　　摘 　要 : 以4 个蔺草代表性品种 鄞蔺 1 号 、农林 4 号 、岗山和太草 为材料 , 采用 SSR 引物对基因组 DNA 进行 PCR 扩增 。结果表明 , 67 对 SSR 引物在 4 个品种中均有扩增条带 。其中引物 RM24 在鄞蔺 1 号和其它 3 个品 种之间具有明显差异 。而引物 RM267 和 RM330 在农林 4 号和其它 3 个品种间表现多态性差异 。因此 , SSR 引物 RM24 可初步作为区分我国蔺草品种与其它国家或地区品种的DNA 指纹标记 。 关键词 : 蔺草 ; 微卫星标记 ; DNA 指纹 + ( ) 中图分类号 : S564 40353 　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 2007 　　蔺草原产亚热带 , 植物学上属单子叶植物纲百 材料均来自茎尖组培苗 。 合花 目灯心草科灯心草属的多年生宿根性草本植 12 　基因组 DNA 提取 物 , 俗称席草 , 其草茎可编织榻榻米 、草席 、草 采用 CTAB 法提取蔺草基因组总 DNA , 方法参 垫 、草扇和草篮等[1 ,2 ] 。所织席子 以浙江宁波 的 照文献 [6 ] , 略有改动 。操作步骤如下 : 称取1 g “宁席”、江苏仪征县的 “朴席”和吴县的 “苏席” 草茎 , 加液氮研磨成粉沫 , 在液氮未挥发完之前加 被誉为三大名席 , 尤其是 “宁席”主要出口日本 , 入10 ml预热的 CTAB 提取缓冲液(625 mmol 乙基黄 [3 ] 已成为宁波市外贸收入的主要农业产品 。 原 酸 钾 盐 , 05 % 十 六 烷 基 三 甲 基 溴 化 铵 2003 年 7 月 8 日日本正式实施 《种苗修改法》 cetyltrimethyl ammonium bromide , 700 mmol NaCl , 后 , 我国许多企业从日本引进的品种都有可能成为 10 mmol EDTA 和100 mmol Tris 。pH 值 75) , 振荡 “侵犯”日本新品种专利的靶子 。为此 , 对我国现 混匀 , 60 ℃温浴1 h 。然后加入等体积的酚 、氯仿混 有的蔺草品种资源进行有效的分子鉴定显得尤为重 合液 , 轻 摇 混 匀 后 静 止 10 min , 6 000 rmin 离 心 要 。另外 , 近年来我国蔺草品种混杂非常严重 ,