双酚A 对鲤鱼急性和亚急性毒性的研究[J].pdfVIP

第24卷 第6期 环 境 化 学 Vo1．24，No．6 2005盔 l1月 ENVIR0NMENTAL CHEMISTRY November20o5 双酚A对鲤鱼急性和亚急性毒性的研究 庄惠生 杨 光 (东华大学环境科学与工程学院，上海，200051) 摘 要 以8月龄至 1年龄的鲤鱼为实验对象，研究双酚A (BPA)对鲤鱼 (CommonCarp)的急性毒性和 双酚A在 1／2LD50，1／3LD50’1／4LD50，1／6LD50亚急性浓度下，对鲤鱼肝、肾、鳃中过氧化氢酶 (CAT) 和超氧化物歧化酶 (SOD)的影响．结果表明：双酚A24h，48h，96h的Lc5o值分别为4．46mg·l～，4．3O mg·l～，4．25mg·l～；亚急性毒性指标CAT和SOD对双酚A比较敏感，可作为双酚A污染环境的生物 标志物． 关键词 鲤鱼，毒性，双酚A，过氧化氢酶 (CAT)，超氧化物歧化酶 (SOD)． 作为环境激素类物质，双酚A (BPA)在生殖毒性方面的研究刚刚起步，邓茂先…等分析了双酚 A对成年大鼠曲细精管细胞的形态结构、波形蛋白及p53表达的影响，并就双酚A的雄性生殖毒理学 机制进行了研究．这一研究说明双酚 A既具有雌激素特性，又可能干扰雄性生殖活动的某些机制， 是一种潜在的危险性很大的环境激素类物质． 过氧化氢酶 (CAT)和超氧化物歧化酶 (SOD)可以分别清除体内过量的O一和H：O：，保护细胞 免受活性氧 自由基的氧化损伤，因此，CAT和SOD的活性高低可以间接地反映鱼体内活性氧的水平 和细胞受氧化损伤的程度． 本文选用分子水平的CAT和SOD作为生物标志物，研究不同浓度下对鱼肝脏、鳃、肾脏中CAT 和SOD的活性变化，为分析评价双酚A的环境安全性提供相应的毒理毒性实验数据． 1 实验部分 1．1 实验动物 鲤鱼购 自鱼市，体长为9．0±0．8cm，体重为 16．7±2．7g．鱼经5％食盐水消毒后进入实验室，用 经过3d自然脱氯 自来水在实验室经过驯养5—7d后用于试验，驯养过程中每天投饵一次，砂头曝气， 但在急性试验前一天和试验期间不予喂食，在驯养期间，鱼的死亡率不超过3％． 1．2 急性毒性试验 采用静态换液法，水温控制在 19—23℃，pH值为7．4—8．0，溶解氧为6—7mg·l～，水质符合 渔业水质标准GB11607—89．按等对数间距设置5—7个试验浓度组及一个空白对照组，每天更换2／3 试液，以乙醇为助溶剂．实验用时96h，LD。的计算方法参照改进寇氏法 ]．所有数据由3组平行实 验得到． 1．3 亚急性试验 亚急性试验浓度分别为 1／6LD50，1／4LD50，1／3LD50，1／2LD50(LD50为96h的半致死浓度)以 及溶剂 (乙醇)对照组共5组．开始暴露前 ，试验鱼逐条测量体长、体重，各组之间试验鱼均无显 著差异，每天更换 1／2试液，每天清除排泄物 1次，分别暴露7d和12d，试验结束前一天停止喂食． 1．4 酶活性测定 将染毒后的鱼杀死取其肝脏、肾脏、鳃，用冰生理盐水清洗其中血液，滤纸吸干，迅速称取适量 置于冰浴中，加入缓冲溶液；测CAT时，加入 1．5ml磷酸盐缓冲液 (pH=7．0)，在 1—4℃下研磨匀 浆 ，并在3000r·min 下离心5min，上清液即为CAT粗酶溶液；测SOD时，加入 1．5ml磷酸盐缓冲 国家自然科学基金资助项 目 维普资讯 6期 庄惠生等：双酚A对鲤鱼急性和亚急性毒性的研究 叭吖肝 !!上!!! 液 (pH=8．2)，在 1_一4℃下研磨匀浆，并在3000r·min 下离心lOmin，上清液即为SOD粗酶溶液． CAT活力测定采用Beers和Sizers紫外分光光度法 ，SOD活力测定