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2.1.1《植物细胞工程的基本技术》学案
一、学习目标:1、1、 _ 组织幼根和芽或胚状体 完整植株。
3.细胞脱分化:已 的细胞经过诱导后,失去其特有的 而转变成未分化细胞的过程。
4.植物组织培养:在 和 的条件下,将 的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生 、丛芽,最终形成完整植株。
(四)、胡萝卜的组织培养
1、实验原理
生物体细胞一般都是由受精卵经过有丝分裂形成的,因而都含有该生物的全套的遗传信息,都具有发育成完整个体的潜能。因此,植物体的根、茎、叶细胞都具有 ,在一定的营养和激素条件下,可以脱分化形成 。将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上,就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽,进而发育成 。
2、实验步骤
①.将 用自来水充分洗净,削去外皮,并切成段。用酒精棉球擦手 。
②.在超净工作台(或接种箱)上将胡萝卜段用 溶液消毒30s后,立即用 清洗2~3次,再用 处理30min后,立即用无菌水清洗2~3次。
③.用 的滤纸吸去胡萝卜段表面的水分。然后,在 瓷砖上,用无菌的解剖刀将胡萝卜段切成1 cm厚的横切片,再选取有 的部位,切取1 cm。左右的小块。
④.将 接种到培养基上,用锡箔纸封盖瓶口,并用橡皮筋扎紧。然后,在培养瓶上贴上标签,写明材料名称、接种日期和小组号。
⑤.将接种后的胡萝卜组织块,放在 恒温避光条件下培养。4d后,检查培养材料的污染情况;14d后,观察愈伤组织的生长状况。然后,在恒温箱中继续避光培养。在培养过程中,注意定期观察和记录愈伤组织的生长情况。
⑥.培养一段时间后,将生长良好的 转接到分化培养基上,培养一段时间后,胡萝卜的愈伤组织就可以诱导出 。然后将试管苗移栽到大田,培养成 。
◆3、注意事项
⑴.外植体的选择与制备
①选择外植体时,由于外植体的脱分化难易因植物种类、器官来源及生理状况的不同而有很大差异,因此,选择哪些作为外植体应该注意。一般来讲,烟草、胡萝卜,植物的花和幼嫩的组织脱分化相对较易,而植物的茎、叶和成熟的老组织则较难。另外制备外植体时应选取有形成层的部分,因为形成层细胞易脱分化。 ②制备外植体首先要消毒,其次要选取有形成层的部分,因形成层细胞易脱分化。
⑵.植物组织培养注意的要点
①培养基包括所有操作工具都应进行消毒和灭菌,谨防杂菌污染。
②需在无菌条件下操作。 ③接种,继代培养的转移都应在接种箱内进行。
⑶.对于植物组织培养来说,光照条件非常重要,包括光照强度、时间和波长。但在由高度分化的组织形成愈伤组织的诱导阶段往往要暗培养,而在分化形成试管苗的再生的过程中一定要有光照。诱导形成愈伤组织阶段的暗培养有利于细胞的脱分化产生愈伤组织,如果在光照条件下容易分化产生维管等组织,不利于产生大量的愈伤组织。由愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗的过程中需要光照,原因是叶中叶绿素的合成需要光照条件。
(五)、植物体细胞杂交技术
1.概念:不同种植物的 ,在一定条件下融合成 ,并把杂种细胞培育成新的 的技术。
2.过程
离体的细胞不同细胞原生质体原生质体融合 →杂种细胞→杂种植株。
3.原理: 和 。
3、去除细胞壁的方法: 。细胞融合的方法: 。细胞融合的标志: 。
三、反思总结.
本节学习了植物组织培养和植物体细胞杂交技术尝试进行植物组织培养。
四、当堂检测
l、有关全能性的叙述,不正确的是( )
A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体,因此全能性最高 B.生物体内细胞由于分化,全能性不能表达
C.卵细胞与受精卵一样,细胞未分化,全能性很高 D.植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性
2、在生物体内,细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,是因为 ( )
A.基因的表达有选择性
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