纳米材料MCM241的制备及其固定化酶的研究.pdfVIP

第 33 卷 第 1 期 北 京 化 工 大 学 学 报 Vol. 33 , No. 1 2006 年 JOURNAL OF BEIJ IN G UN IV ERSIT Y OF CHEMICAL TECHNOLO GY 2006 纳米材料 MCM41 的制备及其固定化酶的研究 1 ,2 1 1 , 2 赵炳超 　肖 　宁 　马润宇 　石 　波 ( 1 北京化工大学生命科学与技术学院 , 北京 　100029 ; 2 中国农业科学院饲料研究所 , 北京 　100081) 摘 　要 : 在使用扩孔剂间三甲苯的条件下 ,对新型大孔纳米材料 MCM41 进行了制备 ,并对该材料作为载体固定 化木瓜蛋白酶进行了研究。X 射线衍射和氮气吸附表征结果表明 :材料内部孔的排列高度有序且孔径集中分布在 63 nm 附近。用该材料作为载体固定化木瓜蛋白酶的结果表明:在给酶量、戊二醛质量分数、时间、温度和p H 值分 别为 20 mg/ g ,075 % ,2 h ,10～20 ℃和 7 0 的条件下 ,固定化酶的回收率为 55 %左右 ,效果最佳。 关键词 : 纳米材料 MCM41 ; 固定化; 木瓜蛋白酶 ; 戊二醛 中图分类号: Q8142 ( ) ( ) 　　在过去的半个多世纪里 ,有关酶固定化的研究 酸 TCA 、正硅酸四乙酯 TEOS 、十六烷基三甲基 [13 ] ( ) ( ) 很多 ,而固定化载体是影响固定化酶性质的重 溴化铵 CTAB 、间三甲苯 TMB 、AlCl ·6H O 以 3 2 [4 ,5 ] ( 要因素 。纳米材料 MCM41 是 Mobil 公司开发 及配制缓冲溶液所用的试剂均为分析纯 北京化学 ( ) ) 的 MCM 系列 Mobil Composition of Matter 分子筛 试剂公司 ;实验中所用的磷酸盐、磷酸盐/ 碳酸盐以 中的一类 , 具有高度有序、孔径分布范围很窄的孔 及碳酸盐缓冲液均为 01 mol/ L 的钠盐; 木瓜蛋白 道 ,且孔径可在 2 ～10 nm 之间调节[67 ] 。该载体不 酶和酪蛋白分别溶解于 p H 值 70 的磷酸缓冲液中 仅固定酶的量很大 ,且使酶分子沿孔道依次分布 ,并 制成质量浓度 1 mg/ mL 和 5 mg/ mL 的溶液;激活剂 未使其堆积在一起。因此可以使固定化酶表现出最 是半胱氨酸和 ED TA 的浓度分别为20 mmol/ L 和 1 大的活性。MCM41 是一种新型的无机类固定化载 mmol/ L 的p H 值 70 的磷酸缓冲液; TCA 溶于去 体 , 曾有用小孔 MCM41 固定化木瓜蛋白酶的报 离子水中制成质量分数为 5 %的溶液; 戊二醛用去 道[8 ] ,但由于孔径偏小 , 固定化效果不太好。本文 离子水稀释为 75 % ,备用。