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GE Healthcare 应用指南 中空纤维 中空纤维过滤技术在百白破疫苗中的应用中空纤维过滤技术在百白破疫苗中的应用 王奕军 通用电气医疗集团 前言前言: 百日咳、白喉、破伤风混合疫苗简称百白破疫苗，它是由 5%-30%蔗糖密度梯度离心 ,去除内毒素((4) 百日咳疫苗、精制白喉和破伤风类毒素按适量比例配制而 成，用于预防百日咳、白喉、破伤风三种疾病。目前使用 的有吸附百日咳疫苗、白喉和破伤风类毒素混合疫苗(吸附 百白破)和吸附无细胞百日咳疫苗、白喉和破伤风类毒类混 合疫苗(吸附无细胞百白破)。目前国内的工艺基本上属于七 用戊二醛对百日咳毒素进行脱毒处理 ,5%精氨 (5) 酸终止反应( 八十年代工艺，整个过程中所用的透析步骤,常规过滤的步 骤非常多,这样大大的影响了整个制品的工艺生产进程。 GE公司的中空纤维是设计为开放式通道的切向流膜过滤产 品，在整个生物下游分离中具有低剪切力，高活性收率的 透析去除戊二醛 ,超声波打散((6) 优点，特别适合处理高浓度、高粘度、高颗粒度样品的分 离。根据中空纤维的独特的优点，我们对百白破工艺流程 中作了一些有益的尝试，获得了不错的。 预处理后灌装(7) 原有百日咳大致工艺流程原有百日咳大致工艺流程 图１:百日咳工艺流程 菌种接种液体培养基发酵 ((1) 在整个工艺过程中，我们在第(3)步工艺，透析脱去铵离子 的这一步，以及工艺第(6)步,透析去除解毒剂戊二醛这一步 分别作了有益的尝试，取得了不错的实验结果。 33%+50% 两步硫酸铵沉淀 ((2) 盐析沉淀,缓冲液抽提百日咳毒素和丝状血凝 (3) 素透析去除铵根离子 ( 中空纤维脱铵离子实验中空纤维脱铵离子实验: 实验过程 实验过程: 实验过程采取了先对料液进行浓缩5倍左右,后续 系统:Quixstand 系统　　　　　 立即洗滤,洗滤体积为8倍体积后即可达到戊二醛合格的结 果在透析去除戊二醛这一步,样品溶液属于一个多絮状的 状态,传统工艺上透析袋去除戊二醛,一般都需要三天以上 的时间,给整个工艺过程带来了不稳定因素,透析时间过长 一方面容易染菌,另一方面也对蛋白的收率活性带来一定 的影响,这边尝试用10k中空纤维代替透析, 在滤出体积为 原料液体积8倍以上体积时候即可达到去除戊二醛的目的, 另外我们也尝试实验过程采取了先对料液进行浓缩5倍左 右,后续立即洗滤,在滤出体积为滤体积为4