兔肌腱细胞和成纤维细胞与人工材料体外联合培育的形态学观察.pdfVIP

中国修复重建外科杂志 1997 年第 11 卷第 2 期 ·103 · 兔肌腱细胞和成纤维细胞与人工材料 体外联合培养的形态学观察△ 1 1 2 张前法 　杨志明 　彭文珍 　　摘 　要 　　在兔肌腱细胞 、成纤维细胞分离培养的基础上 ,将冻存复苏的传代细胞与碳纤维 、 涤纶及几丁质三种材料体外联合培养 ,观察细胞与材料的相容性以及细胞在材料上的生长情况 , 比较这两种细胞在三种材料上的生长差异 。结果发现 ,在体外培养条件下 ,碳纤维与两种细胞的 相容性均好 ,有 良好的吸附性 ;涤纶材料上两种细胞生长均少 ,可能与其表面结构有关 ;几丁质明 显抑制这两种细胞生长 。同时发现 ,无论肌腱细胞 ,还是成纤维细胞 ,在碳纤维上座落的数量都明 显优于涤纶 、几丁质 。三种材料交错在一起时 ,胶原纤维方向是以碳纤维为轴 ,形成网状 ,交织缠 绕在材料之间。随时间延长 ,细胞在单根碳纤维或多根碳纤维上排列均匀 ,包绕碳纤维 ,且相互衔 接 。研究结果 ,为进一步研究有生命的人工肌腱 、韧带提供了依据 。 关键词 　　肌腱细胞 　　成纤维细胞 　　人工材料 　　体外联合培养 　　在成功地进行了兔肌腱细胞 、成纤维细 1. 6 　观察指标 　在倒置显微镜下观察细胞与材料 胞分离培养 、冻存复苏及传代培养之后[ 1 ] , 的相容性 ,观察细胞在材料上的生长情况 , 比较两种 为了研究这两种传代细胞与碳纤维 、涤纶及 细胞在三种材料上的生长差异 。 几丁质三种材料的相容性 , 以及细胞在材料 1. 7 　扫描电镜观察 　在倒置显微镜下以单根碳纤 维被细胞包绕为标准 ,一般体外联合培养 7 d 后将 上的生长 、繁殖和分泌胶原的功能而设计了 材料从培养基中移出 ,在 37 ℃条件下 ,用 Hank ’s 平 本实验 ,为进一步研究活细胞与人工材料复 衡盐溶液冲洗一次后 , 固定在 3 %戊二醛磷酸缓冲 合 ,成为“有生命的新材料”的可能性提供科 ( ) 液 p H = 7 . 4 中固定 1 h , Hank ’s 液冲洗 ,然后乙醇 学依据 。 逐级脱水 2 d , 以减少细胞皱缩度 。干燥 、喷金 ,扫描 电镜下观察 。 1 　材料与方法 1. 1 　人工材料 　碳纤维编织带( ) 兰州碳素厂提供 , 2 　结果 ( ) ( 几丁质编织带 第二军医大学提供 ,涤纶编织带 手 2 . 1 　倒置显微镜 　把碳纤维编织带分别置入两种 ) 术用缝合线 ,均剪成长 2 cm 备用 。 细胞培养基中轻轻摇匀后 ,从单根碳纤维或编织带 1. 2 　复苏第 2 ,4 代兔肌腱细胞和成纤维细胞 。 两端即看到悬挂于碳纤维上的圆形细胞 ,细胞中心 1. 3 　培养液用 F12 培养基加 20 %新生小牛血清 , ( )