兔髓核细胞体外最佳培育条件的探索.pdfVIP

中国矫形外科杂志 　2005年 7 月第 13卷第 14 期 　O rthop J Ch in, Vo l. 13,No. 14 Ju ly 2005 10·93 · ·实验研究 · 兔髓核细胞体外最佳培养条件的探索 张传志 　周 　跃 　李长青 摘 　要 : [ 目的 ] 探索髓核细胞培养的最佳条件 , 为进一步作为椎间盘组织工程种子细胞 提供可能 。[方法 ] 以 DM EM / F12 ( 1 ∶1, 添加 FB S 10% , pH 7. 2) 作为基础培养液 , 通过依 次改变培养液 pH、胎牛血清浓度 、抗坏血酸浓度 、培养温度 、CO2 浓度以及培养板处理 , 计 数 10d克隆形成数 , 检测细胞生长代谢 , 确定最佳培养条件 。[结果 ] ( 1) 髓核细胞不易贴壁生长 , 在未经处理的培 养板中进行单层培养细胞增殖能力较弱 , 克隆形成少 ; 而铺被多聚赖氨酸的培养板中培养可以较快贴壁并形成相对较 ( ) ( ) μ 多的克隆; 2 生长培养液在 DM EM / F12 1 ∶1 , pH7. 0、胎牛血清浓度 15% 、抗坏血酸 30 g/m l、温度 37 ℃以及 CO2 浓度为 5%时 , 髓核细胞生长良好 , II型胶原和聚集蛋白聚糖 ( aggrecan) mRNA 表达增高 。[结论 ] 在最佳培养 条件下 , 髓核细胞生长状态 良好 , 为椎间盘组织工程髓核细胞的培养奠定了基础 。 关键词 :髓核细胞 ; 　细胞培养 ; 　椎间盘 ; 　组织工程 O p tim ized cond ition s for the grow th of rabb it nucleus pulposu s cells cultured in v itro ∥ ZHAN G Chuan zh i, ZHOU Yue, L I Chang qing. O rthop ed ic D ep a rtm en t of X inqiao H osp ita l, Th ird M ilita ry M ed ica l Un ivers ity, Chong qing 400038 Ab stract: [ O bjective] To op tim ize the cu ltu re condition s of rabb it nucleu s p u lpo su s cells a s seeding cells in the in terverte bral disc tissue engineering. [M ethod] By sequentially changing the cu lture condition sw ith DM EM / F12 (w ith 10% fetal bovine serum and pH was adju sted to 7. 2) as the ba sal m edium , op tim ized cu ltu re condition swere determ ined by coun ting the number of cell colon ies form ed in 10 days after the cell had been p lated. [ Result] 1) In polyL lysine ( PLL ) coated cu lture p lat