超高效液相色谱法检测猪肉中乙酰甲喹及其主要代谢物.pdfVIP

动物医学进展 ，2013，34(1)：38—42 ProgressinVeterinaryM edicine 超高效液相色谱法检测猪 肉中乙酰 甲喹及其主要代谢物 利光辉 ，杨 帆。，林燕茹 ，方其丰 (1．揭阳出人境检验检疫局，广东揭阳 522031；2．河南科技大学动物科技学院，河南洛阳471OO3) 摘 要：建立了猪肉中乙酰 甲喹及其4种主要代谢物的超高效液相色谱检测方法。试样用二氯甲烷 ／正己 烷混合溶液、超纯水、50mL／L三氯 乙酸溶液提取 3次，经有机溶剂提取完之后，在氮气下吹干，残渣 以 300mL／L甲醇水溶液溶解，之后和水相提取液合并，经Strata-X固相萃取小柱净化，用超高效液相色谱法检测 猪肉中乙酰 甲喹及其 4种主要代谢物。选择 甲醇一0．2ml／L 甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速为 0．5mL／min，在 241nm波长处检测。该方法检测的乙酰甲喹及其 4种代谢物均在0．05 g／g～1Optg／g范围内 线性 良好，相关系数均大于0．999；乙酰甲喹、M1、M2、M5和 MIO在 0．1、1、10 g／g三水平加标回收率分别为 80．5 ～91．3 、79．3 ～88．3 、86．1 ～98．396／、77．9 ～88．4 和 82．9 ～94．2 ；批 间变异系数分别为 9．3 ～9．695／、5．4 ～8．6 、7．3 ～9．2 、5．3 ～8．396／和 6．4 ～8．9 。乙酰甲喹及其4种代谢物在猪 肉 中的检测限均为0．O1~／g／g，定量限均为0．04ffg／g。本研究所建立的方法灵敏 、准确、高效，可用于猪肉中乙酰 甲喹及其主要代谢产物残留分析 。 关键词 ：乙酰甲喹；代谢物 ；超 高效液相色谱 ；残留；猪 肉 中图分类号 ：$859．796 文献标识码 ：A 文章编号 i1007—5038(2013)01—0038—05 乙酰 甲喹(mequindox，MEQ)，商品名痢菌净 ，属 物 ，利用超高效液相色谱 (UPI )技术 ，建立了同时测 于喹嗯啉一N-1，4一二氧化合物的衍生物，化学名为3一甲 定猪肉中乙酰甲喹及其 4种代谢物的方法。 基一2一乙酰基喹嗯啉一N_l，4一二氧化合物，是我 国 自行 1 材料与方法 研制的一类新兽药口]。乙酰甲喹对仔猪黄痢和白痢、 1．1 材料 猪痢短螺旋体感染及鸡大肠杆菌病等均有较好的临 1．1-1 仪器 ACQUITY超高效液相色谱仪，配备 床疗效 ]。但该药在不 同动物体 内均广泛代谢_l2_5]， TUV检测器，美 国Waters公司产 品；组织匀浆器， 其代谢物在鸡体 内就多达 24种[4]。毒理学研究显 T25数显型，德 国IKA公司产品；氮气吹干仪，GM- 示 ，乙酰甲喹的代谢物具有疑似的细胞毒性[6]、光敏 2100型，日本 EYELA 公司产 品；多功能振荡器， 毒性和遗传毒性_7等，因此监控动物性食品中的乙酰 KSS01型，马来西亚IKA公司产品；固相萃取装置 ，美 甲喹及其代谢物的残留量具有重要意义。 国Waters公司产品；高速冷冻离心机，5804R型，德 国 目前，已有的文献报道中仅检测了动物可食性组 Eppendof公 司产 品；Milli—Q 超 纯 水 制 备 系 统， 织中乙酰甲喹的两种代谢物 (喹嗯啉一2一羧酸和 3一甲基 F3PN33491型，美 国Millipore公司产品；Strata-X 固 喹嗯啉一2一羧酸)L7J。但乙酰甲喹的主要代谢物或残留 相萃取小柱，柱体积为 60mg／3mL，美国Phenomenex 标示物尚有争议，ShanQ等 研究显示乙酰甲喹在鸡 公司产品；数控超声波清洗器，KH一500DB型，昆山禾 体内的代谢物虽多达 24种，但并未检测到喹嗯啉一2一 创超声仪器有限公司产品；两用型隔膜真空泵，GM- 羧酸和3一甲基喹嗯啉一2一羧酸；LiuZY等c3利用大鼠、 1．0A型，天津市津腾实验设备有限公司产品；针筒式 鸡和猪的肝微粒体进行的乙酰甲喹体外代谢研究结 滤膜过滤器，孑L径为 0．2 m，天津市津腾实验设备有 果也与此类似。因此，在乙酰甲喹残 留标示物尚未确 限公司产品；可调微量移液器