过氧化氢酶高产菌株EIM-70的鉴定及产酶培养基的优化.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sei．2013，41(1)：33—36 责任编辑 朱琼琼 责任校对 况玲玲 过氧化氢酶高产菌株 ElM-70的鉴定及产酶培养基的优化 杨鹤，蔡少丽，李力，张爱平，黄建忠 (福建师范大学，工业微生物教育部工程研究中心，生命科学学院，福建省现代发酵技术工程研究中心，福建福州 350108) 摘要 [目的]对过氧化氢酶高产菌株 EIM-70进行鉴定，并对其产酶培养基进行优化。[方法]对EIM-70菌株进行形态学分析及 16S rDNA序列的系统发育进化分析 ，以鉴定其所属菌种；在采用单 因素试验确定EIM-70产过氧化氢酶的最适碳、氮源基础上，采用Plaekett — Burman试验设计筛选出对产酶影响显著的因子，再利用最陡爬坡试验和响应面分析法确定最适产酶培养基配方。[结果 l试验将 EIM-70菌株鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillussubitilis)；EIM-70的最适产酶培养基为 ：葡萄糖 19．25 L、NaNO 9．25g／L、FeSO ·7H，O 2．46x10～g／L、MgSO4·7H2O0．50g／L、Na2HPO4·12H209．25g／L、KH2PO0．60g／L、2。麦芽汁，优化后BacillussubitilisEIM-70的液体 发酵产过氧化氢酶的活力可达6927．45u／ml，比优化前提高 1．87倍。I结论]该研究为过氧化氢酶的工业化生产奠定了基础。 关键词 过氧化氢酶；枯草 芽孢杆菌；Plackett—Burman设计；响应面分析 中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2013)01—00033—04 IdentiffcationofCatalase．producingStraiuEIM _70andIts0ptimizationofSubmergedFermentationMediums YANGHeetal (EngineeringResearchCenterofIndustrialMicrobiology．EngineeringResearchCenterofFuiianModernFermentation Technology，MinistryofEducation，CollegeofLifeScience，FuiianNormalUniversity，Fuzhou，Fujian350108) Abstract f0biectiveI11}leaimwastoidentifyahighcatalase—producingstrainEIM-70andoptimizeitssubmergedfermentationmediums． 『MethodlThestrainEIM一7Owasidentifiedbythemorphologicalanalysisandphylogeneticanalysisof16SrDNAsequence；theoptimalcarbon andnitrogensourcesforEIM一70oncatalaseproductionwereobtainedbysingle—factorexperiments．the191ackett—Burmandesignwasadopted toscreenoutthesignificantrelatedfactorsbasedonthis．theoptimalfernmntationmedium wasobtainedbythesteepestascentsearchexperi— mentandresponsesurfacemethodology．1ResultlThestrainEIM-70wasidentifiedasBacillussubitilis；theoptimizedmediumofreatalase productionwasglucose19．25g／L，NaNO39．25 L，FeSO4·7H202．46×10-3g／L，MgSO4 ‘7H200．50 L，Na2HPO4 ‘12H2O9．25 g／L．KH PO 0．60 L and2。maltextract．inthismedium．theeatalaseactivityofBacillussubitilisEIM一70wasupto6927．45U／m1and 1．87timeshigherthancontro1．{ConclusionlItprovidedfoun