发情周期不同时期猪卵泡颗粒细胞凋亡的观察.pdfVIP

动物学报 　48 (6) :759～763 , 2002 A cta Zoologica S inica 　　　　　 　 发情周期不同时期猪卵泡颗粒细胞凋亡的观察 ① ① ① ① ② ①② 刘忠华 　马所峰 　岳奎忠 　刘海兰 　陈清轩 　谭景和 ( ①东北农业大学生命科学学院 , 哈尔滨 150030) ( ②中国科学院遗传与发育研究所 , 北京 100080) ( ③山东农业大学动物科技学院 , 泰安 271018) 摘 　要 　为探讨猪发情周期不同时期卵泡发育和闭锁的规律及机理 , 本实验通过 TUN EL 原位标记、H. E. 染色 以及放射免疫测定等手段研究了猪发情周期不同阶段卵巢表面各类卵泡数量的变化、各类卵泡中颗粒细胞的凋 亡比例、闭锁卵泡的形态变化以及发情周期各阶段血清孕酮及雌二醇水平的变化等问题。卵泡的总数在发情间 期最多 , 为 26 8 个/ 卵巢 , 发情期最少 , 为 7 4 个/ 卵巢。小卵泡的数量在发情间期最多 , 为 15 个/ 卵巢 , 在发 情期数量最少 , 为 57 个/ 卵巢。中等卵泡数量在发情间期最多 , 为 85 个/ 卵巢 , 在发情后期卵巢中无中等卵 泡。大卵泡的数量在发情前期最多 , 为 7 4 个/ 卵巢 , 在发情后期最少 , 为 0 个。小卵泡的颗粒细胞凋亡比例 (各时期平均 21 03 %) 显著高于大卵泡 , 在发情后期显著降低。中等卵泡的颗粒细胞凋亡比例 (平均 166 %) 在发情前期显著低于其它各期。大卵泡的颗粒细胞凋亡比例 (平均 112 %) 在发情周期各阶段无显著差异 , 均 显著低于中等卵泡和小卵泡。 关键词 　猪 　发情周期 　卵巢 　卵泡闭锁 　细胞凋亡 　　哺乳动物在达到性成熟以后 , 每个发情周期中 1 　材料与方法 卵巢上的卵泡都发生周期性的生长发育和闭锁变 化 , 研究这种变化规律对于人为控制动物繁殖具有 11 　发情周期各时期的划分 重要意义。早期人们曾从普通生理学的角度对各种 实验动物为大庆采油二厂机械化养猪场的性成 动物发情周期中的卵泡发育和闭锁规律及其与内分 熟育肥母猪 , 品种为长白猪与哈白猪的杂交一代。 泌的关系做过研究 ( Irealand , 1987) 。近年来的研 每日早 6 点晚 5 点 2 次观察并记录母猪的发情情 究表明一些生殖系细胞的退化主要是以细胞凋亡方 况 , 选择发情周期正常者用于实验。发情周期各时 式进行的 ( 石 磊等 , 2000 ; 张 健等 , 2001) , 其 期的划分方法是 : ( 1) 观察到外生殖器红肿 , 有较 中就包括卵泡闭锁过程中颗粒细胞的退化过程。随 多粘液流出 , 食欲下降或拒食 , 爬跨其它母猪 , 按 着研究工作的广泛进行人们发现卵泡闭锁的生理机 压后躯出现静立反射的定为发情母猪 ; (2) 发情当 制实质就是颗粒细胞凋亡 (Jolly et al . , 1994 ; 日记为0 天 , 第 3 天定为发情后期 ; ( 3) 第 11 、 William , 1995 ; Miki et al . , 1998) , 于是人们对 12 和 13 天的母猪为发情间期的代表 ; (4) 预计下 卵泡的生长发育和闭锁与发情周期之间的关系从颗 次发情周期开始的前 2 天定为发情前期。 粒细胞凋亡的角度重新进行了深入的研究。然而 , 12 　卵巢的获取及处理方法 这些研究多数都集中于实验动物和以产单胎为主的 猪在早晨 5 点左右屠宰后立即开腹取出卵巢并 家畜上 , 在猪这种产多胎的家畜上 , 进行的研究则