SAHA抑制经Ⅱ型胶原体内致敏的Th1细胞增殖与凋亡.pdfVIP

《现代免疫学}2009年第 29卷第 6期 SAHA抑制经 Il型胶原体 内致敏的Thl细胞增殖与凋亡 周晓荣 ，周芸 ，周光炎 ，季玉红 ，汪晓莺 (1．南通大学医学院免疫学教研室，南通 226001；2．上海交通大学医学院 上海市免疫学研究所 ，上海 200025) 摘要 ：为探索组蛋 白去乙酰化酶抑制剂(suberoylanilidehydroxamicacid，SAHA)对经II型胶原体内致敏T细胞 的体外增殖 影响。以II型胶原致敏 C57B6小鼠 7d后 ，收集引流淋 巴结细胞 。MTT法观察不 同浓度 SAHA对 CII特异性 T细胞增殖 的抑制作用 ；ELISA检测细胞因子表达 ；Annexin-v观察 CII特异性 T细胞凋亡格局 。Caspase3试剂盒检测 CII特异性 T 细胞 中Caspase3酶活性 。结果显示 ，CII特异性 T细胞的体外增殖被 SAHA抑制 ，呈时间和剂量依赖性 。细胞 因子格局 表现为在SAHA处理后 ，CII特异性 T细胞分泌 II～2、II12和 IFN一 明显下降。当 sAHA大于 500nmol／I时 ，CII特异 性 T细胞凋亡 比率增加 ，进一一步的研究表 明，当SAHA大于 1000nmol／L时，CII特异性 T细胞中Caspase3活性 明显高 于对照组。SAHA能够抑制 CII特异性 T细胞增殖和细胞因子产生 ，并可通过上调 Caspase3活性而诱导 CII特异性 T细 胞凋亡 ，增加其抑制 T细胞增殖作用 。 关键词 ：组蛋 白去 乙酰化酶抑制齐；关节炎 ；Thl／Fh2；细胞凋亡 中图分类号：R392 文献标识码 ： A 文章编号 ：1001-2478(2009)06—047005 染色质是核小体形成的串珠状超螺旋结构，而 研究证实，肿瘤细胞 中抑癌基因去乙酰化导致表达 核小体由DNA缠绕在组蛋 白复合物上所构成 。组 抑制和肿瘤病理密切相关 一；而且 ，去乙酰化酶抑 蛋 白修饰包括乙酰化、甲基化 、硫酸化及泛素化等 制剂 (histonedeacetylaseinhibitors，HDACi)已显 多种方式 ，其中乙酰化修饰对基因表达的调节作用 示出对多种肿瘤细胞 的抑制作用，数种去乙酰化酶 可能是最重要的，也是 目前研究最为深入的基因表 抑制剂已进入临床实验 。。最近，HDACi对免 遗传学调节方式 。表遗传学主要研究在基因碱 疫系统的影响开始收到关注，有研究提示 HDACi 基序列不变的情况下 ，染色质结构与基因表达的关 能抑制免疫应答 ，尽管机制 尚不明确 ，但随着研究 系 一 。组蛋 白乙酰化和 DNA上 CpG位点的甲基 的深入，HDACi有可能被开发成治疗 自身免疫病 化是表遗传调控的两种主要方式。一般情况下 ，染 的有效药物 “。类风湿关节炎 (rheumatoidarthri— 色质上组蛋白乙酰化能导致染色质结构疏松，有利 tis，RA)是一种慢性、全身炎症性 自身免疫疾病 ， 于转录因子与基因调控区相结合，基因表达开放 ； 主要累及小关节 ，可伴有心、肺、血管、神经和眼 而组蛋 白去乙酰化导致染色质结构变得致密，基因 等结缔组织炎性损伤。II型胶原蛋 白(type1Icolla 表达关 闭 。。 gen，CII)是 RA 中主要的 自身抗原，SAHA是一 组蛋 白乙酰化水平受乙酰化酶 (histoneacetyl— 种高效、常用的HDACi，主要能抑制 I型 、IIa、 transferase，HAT)和去乙酰化酶 (histonedeacety— IIb型 HDAC的活性 。本研究 旨在观察 SAHA lase，HDAC)调节 。HDAC家族包 括