企鹅珍珠贝Cd-MT的酶联免疫检测试剂盒的研制.pdfVIP

第 27卷第 5期 OODMACH姗RY Vo1．27，No．5 20l1年 9月 | | Sep ．20 11 企鹅珍珠贝Cd—MT的酶联免疫检测试剂盒的研制 PreparationofELISA kitfordetectingCd—MTofpteriapenguin 吴晓萍 廖爱琳 章超桦 卢虹玉 杨 捷z WU Xiao—ping LIAOAi—Z” ZHANGCao—hua LU Hong一 YANGJie (1．广东海洋大学食品科技学院，广东 湛江 524088；2．广东海洋大学现代生化 中心，广东 湛江 524088) (1．CollegeofFoodScienceandTechnology，GuangdongOceanUniversity，Zhanjiang，Guangdong524088，China 2．ModernBio—ChernicalLaboratoryCenter，GuangdongOceanUniversity，Zhanjiang，Guangdong524088，China) 摘要 ：金属硫蛋 白是重金属污染的生物标志物 ，建立其快速 造成的影响越来越严重 。研究[“表 明，贝类对镉 的富 检测方法对环境污染的监测具有重要作用。在成功制备免 集能力极强，水体中的镉能通过食物链在贝类体 内富集，从 抗企鹅珍珠贝Cd—MT多克隆抗体的基础上 ，研制一种可以 而威胁到贝类食品的质量安全 。因此 ，有必要进一步深入研 检测贝类CdMT的间接竞争酶联免疫吸附分析(EI1SA)试 究和监控贝类重金属镉的污染 。 剂盒。经过条件优化 ，该 ElISA 方法 的检测范围为 2．0× 金属硫蛋白(metalIothi0nein，MT)是一类广泛存在于生 10。～3．9×10。ng／mI，检 出限为 1．58ng／mI，半数抑制浓 度 (／C )为 405．92ng／mI，批 内相对标准偏差≤8．7％，批 物体 内的低分子量、富含半胱氨酸 (Cys)、并能被金属诱导合 间相对标准偏差≤5．2 ，添加 回收率 为 84．4 ～132．9 ， 成 的金属结合蛋 白 ]。生长于河 口、海岸等水环境 中的贝类 试荆盒在 4℃下可保存 6个月。 等软体物，由于对外界环境的变化非常敏感且容易富集重金 关键词 ：企鹅珍珠贝；Cd—MT；竞争酶联免疫；试剂盒 属离子 ，常被作为指示生物用于重金属污染的生态毒理学检 Abstract：Metallothionein(MT)wasgenerallyusedforabiomakerof 测_7]。这些软体生物体 内的 MT能在转录水平上被 Cu、 heavymetalpollution．Itwasimportanttoestablishrapidmethodof MT detection formonitoring environmentpollution．Based on the Hg、Cd、Pb、Zn等金属离子诱导合成，其表达水平的高低与 successfulpreparationofpolyclonalantibodyagainstPteria penguin 环境中的金属浓度有直接的关系，可作为金属暴露和毒性效 Cd—M F．anindirectcompe