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毕业论文开题报告 附表二 论文题目 无孔单分散金属螯合亲合色谱固定相的合成及其在生物大分子分离和纯化中的应用 选题方向 应用化学 学生姓名 杨丽 专业 应用化学 学号 12003240335 年级、班级 03级4班 一、选题的来源、目的、意义和基本内容 选题来源指导教师主持的国家自然科学基金 选题目的以无孔树脂为载体，亚氨基二乙酸为配体，选择不同的金属离子制备出不同类型的金属离子色谱（IMAC）填料，将其用于对生物大分子的分离及纯化。 选题意义IMAC） 是基于蛋白质与固定金属离子的配位作用进行分离,是将金属离子固定在载体上，利用金属离子与蛋白质表面组氨酸等的配位作用进行分离，因此可以选择性地分离对金属离子有亲和力的蛋白质。由于其具有较高通用性，柱容量，柱寿命；色谱柱的制备与再生比较容易；在不同色谱条件下柱子具有许多分离功能;多数情况下蛋白质通过柱子仍保持生物活性，并且容易放大和工业化。由于上述特点，IMAC技术成为蛋白质识别和分离纯化的重要工具，在蛋白质分离纯化中得到了广泛的应用。 基本内容1.聚苯乙烯（PST）种子及制备单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯（ＰGMA/EDMA）微球 2. 以ＰGMA/EDMA微球为载体，键合亚氨基二乙酸（IDA），制备无金属离子螯合的IDA裸柱，考察其色谱性能。 3.在IDA裸柱上螯合不同的金属离子，制备不同金属离子的螯合色谱填料，将其用于于对生物大分子的分离和纯化。 二、国内外研究综述 自从1975年Porath等提出固定金属离子亲和色谱(IMAC)概念以来,这项技术在蛋白质的分离纯化中得到广泛应用[1]。　传统IMAC多以Ｓepharose和Detran软胶作基质，它们以天然的糖类物质为原料，生物兼容性好，产品活性回收率高，但软胶有机械强度低﹑分离速度慢，容量随流速的增加而明显下降等问题之一[2]。硅胶是高效亲和色谱中最常用的一种基质材料[3]，它有很高的机械强度﹑颗粒均匀﹑柱效率高．但硅胶适宜的pH范围较窄（２～７．５），而且表面的非特异性吸附也使得他在生物化物质的分离、分析中受到限制．聚合物基质[4]的化学稳定性较硅胶好，可在pH 1-12范围内的流动相中使用，其硬度较多糖类凝胶高，适合于快速的中高压色谱，其亲水性强，减少了蛋白与填料之间的非特异性作用，蛋白活性回收率高，是亲和色谱固定相的发展方向。无孔填料可以有效的避免溶质在固定相颗粒内部的吸附与扩散，克服停滞流动相传质带来的峰加宽、柱效及分离效果降低等缺点，同时由于传质速度加快，两次操作间的平衡时间也大为减少，对于快速分离十分有利，特别适合于生物工程产品的快速分离分析。我们曾报道以３～５μm无孔PGMA/EDMA微球为基质的强阳离子交换（ＳＣＸ）［６］（ＷＣＸ）［７［８］μm无孔PGMA/EDMA微球为基质的亲和色谱固定相用于对生物大分子物质的分离还未见报道。 三、参考文献 1. 邸泽梅，陈国亮，雷建都，李容，李华儒.金属螯合亲和色谱介质的合成及其色谱特性研究.色谱.1998,16(4):297 2 Ｓcouten W H. Affinity Chromatography, Bioselective Absorption on Inert Matris. New York: John Wiley sons, 1981 Gao H, Gilpin R, Liq L. Chromatogr. Rel. Technol.,1997,20:21 4. 刘彤，耿信笃。色谱，2000，18：30。 5. L.R.斯奈得，J.J.科克兰著.现代液相色谱法导论(高潮，陈新民，高虹译).北京:化学工业出版社，1988 Gong B L, Zhu J X, Li L, Qiang K J, Ren L.Talanta.. 2006，66：668 朱金霞, 卜春苗, 龚波林. 色谱. 2006 ，24：129 8 强克娟，朱金霞，卜春苗.分析测试学报，2007，26（1）：8-12 四、指导教师意见 教师必须认真查看开题报告，认真填写意见，不少于150字，可打印页可手写！ 指导教师签名：必须用黑体填写 ，不得打印 年 月 日 五、学院毕业论文领导小组审核意见 领导小组组长签名 年 月 日 论文资料 该处填写：指导老师主持的项目；如没有项目，填写“自选”；“教师指定的题目” 根据论文内容，也可填写二级学科名称如：有机合成、分析化学、天然产物分析、无机化学、化学教育研究， 参考文献使用上标，必须与后面的参考文献一一对应，且不少于8篇。 二级标题均使用五号、宋体、加黑 正文使用五号、宋体，行间距20磅