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聚乙烯亚胺的修饰及其作为基因载体的研究 尹东锋 ，游庆霞，刘 jl}，曾一平 (兰州军区乌鲁木齐总医院药剂科，乌鲁木齐市 830000) 中图分类号 R965 文献标识码 A 文章编号 2009)34 267304 摘 要 目的：考察聚氧乙烯硬脂酸酯 (POES)修饰聚乙烯亚胺 (PEI)后聚合物的细胞毒性及其与DNA形成复合物后的载体性 质 。方法：使用琥珀酰亚胺碳酸酯法将 POES连接在 PEI上 ，通过 H—NMR确定接枝聚合物的结构 ，将接枝聚合物与 DNA形成 复合物后考察其琼脂糖凝胶电泳行为及测定其粒径、Zeta电位 ；MTT法考察接枝聚合物的细胞毒性，使用质粒 pGL3一lus作为报 告基 因，测定虫荧光素酶活性 以评价复合物对 Hela细胞的转染效率。结果：H—NMR结果表明接枝聚合物具有较高的纯度。凝胶 电泳表明接枝聚舍物对DNA 的包裹能力随着N／P值的增加而升高，随着POES接枝数 目的增大而降低。复合物的粒径小于 300 nnl，Zeta电位随 ／P值 的增加而升高。接枝聚合物细胞毒性显著低于PEI，POES接枝数 目低的聚合物转染效率较高。结论 ： POES修饰的 1 1可 以作为一种有效的非病毒基 因载体 关键词 聚乙烯亚胺；基因载体；复合物；转染；细胞毒性 M odification ofPolyethyleneim ineasaGeneticCarrier YIN Dong—feng，YOU Qing—xia，LIU Jing，ZENGPing(Dept。ofPharmacy，UrumqiGeneralHospital， LanzhouMilitaryRegionofPLA，Urumqi830000，China) ABSTRACT OBJECTIVE：T。studythecytotoxicityofthegraftpolymerafterpolyelhyleneimine(PEI)hadbeenmodified bypolyoxyethylenestearate (POES)andthepropertyofthecarrier，grafted—polymer／DNAcomplexes．METHODS：To modifyPEIbyconjugatingPEItoPOESwithsuccinimidylcarbonatemethod．Structuralanalysisofsynthesizedpolymerwas performedbyusingH NMR．Agarosegelelectrophoresis(AGE)behaviorofthegraftpolymer／DNAcomplexeswasobserved with particlesizeand zetapotentialmeasured．ThecytotoxicityofthegraftpolymerwasevaluatedbyMTT method．The pGL3一lusserved asareportergene．and the】ueiferaseactivitywasdetermined to evaluate thetransfection efficiency of grafted—polymer／DNA onHelacells．RESULTS：H NM R showedthatthegraftpolymerhad highpurity．AGE showed thattheDNA ～wrappingabilityofthegraftpolymerwereincreasedwiththeincreaseofN ／P ratios．anddecreasedwiththe increaseofthePOESgraftnumber．Thesizeofcomplexeswasbelow 300nm，andthezetapotentialofthecomplexesincreased withtheincreaseofN ／P ratios．ThegraftpolymershowedsignificantlylowercytotoxicitythanPEI．Thegraftpolymerwith lowerPOESgraftnumberhadhighertransfectionefficiency．C0NCLUSIoNS：ThePoES—modifledPEIcanbeusedasan effectivenon viralgeneticcarrier． KEY