多糖添加对固体基质培养发菜细胞生物量的影响.pdfVIP

多糖添加对固体基质培养发菜细胞生物量的影响 陈雪峰,尹文翠 陕西科技大学生命科学与工程学院,陕西西安, 摘 要 选用粗沙、细沙和三种固体材料作为培养基质,以为培养液,研究了不同浓度的阿拉伯胶、 海藻酸钠和果胶对发菜细胞生物量的影响情况。实验结果表明,添加多糖有利于发菜细胞的生长,其中以细沙 为固培基质,在培养液中添加 . %的果胶,发菜细胞生物量最大,生长速率最快。 关键词 多糖,固体基质,发菜细胞,生物量 发菜 是发状念珠藻的简 藻酸钠。 . 方法 称,隶属蓝藻门,主要生长在干旱、半干旱地区的荒漠 . . 原料分级及粒度测量 地带,是一种经济价值很高的食用性蓝藻¨ 。发菜 河沙采用不同目数的泰勒标准筛进行筛分,粒度 具有光合作用和固氮作用,是荒漠土壤中有机碳和氮 小于 目的河沙收集后命名为细沙,粒度在 ~ 目 的重要来源,对维持荒漠草原生态系统具有重要意 的河沙收集后命名为粗沙。分别对细沙、粗沙和义。发菜生长缓慢,自然资源非常有限,目前虽有关 固体基质材料清洗直至清洗水透彻明亮, 烘干。 于发菜固体培养的研究报道 ,但是发菜的大面积 显微镜法是测定粒度分布最直观的方法 ,随 人工种植尚未成功实现。 机选取少量 种材料,材料为圆柱形,粒度用长 本课题研究了一种较为简便的加速固体培养发 ×宽表示,细沙和粗沙均属于不规则形状,粒度也用 菜细胞生长的方法。选取粗沙、细沙和三种不 长 ×宽表示。 同的固体基质材料,通过添加不同浓度的胞外多糖调 . . 发菜细胞的固体培养 节发菜细胞与固体材料的润湿性,来提高发状念珠蓝 固体基质材料选用粗沙、细沙和,培养液为 细菌在固体基质上的的生长速率,以期为发状念珠蓝 ,收集发菜细胞 洗涤、离心后,用 稀释, 细菌的大规模栽培奠定一定的理论基础。 细胞浓度为 。: . 左右。取稀释液滴加于 材料与方法 所有培养皿内,并补加 含有 . %, . %, . %, . %的多糖培养液 ,同等方法补加 . 材料 培养液至作为空白对照,加盖置于光照 . . 发菜单体细胞 培养箱内培养。光照强度/ ,光暗比 发菜采集于宁夏银川贺兰山东麓。将发菜原植 : 白天从 : ? : ,夜晚 : 一次:, 体经光合活性恢复,匀浆法分离单体细胞,纯化后,收 白天温度 ℃,夜晚 ℃,每 ~ 天补少量水,使固 集细胞,重新悬浮于新鲜 培养基中,备用。 体基质材料表面保持湿润,每 天取样测定生物量。 . . 固体培养基质 . . 生物量的测定 选取河沙 粗沙、细沙 和 不同润湿性的固 采用叶绿素含量法间接测定发菜细胞生物 体培养基 ,用水洗涤干净,烘干,添加量以平铺至 量 ,发菜细胞中的叶绿素含量计算 :培养皿高度为宜,即粗沙和细沙每培养 , 皿用量 ,每培养皿。/ /培养皿 .× 样 . . 添加多糖 . . 数据统计分析 选用食用级的阿拉伯胶;食用级果胶;食用级海 所有实验数据重复 次测定,采用 . 软 件处理。数值采用均数 平均数 ±标准差来表示, 第一作者:教授,博士生导师。 陕西科技大学博士科研启动基金项目 ?并作差异性分析。 收稿日期:? ? ,改回 期: ? ? 生苤 鲞蔓 塑璺蔓 塑塑 不同固体基质材料平均粒度见表 。 实验结果 . 固体基质材料粒度 表 不同固体基质材料的平均粒度 单位: 由表 可知,平均粒度最大,粗沙次之,细沙 以粗沙为固体基质,在 培养液中分别添 最小。依据其粒度大小, 种固体材料属于中等大小 加阿拉伯胶、海藻酸钠和果胶,设定多糖浓度均为 的颗粒。 .%、 . %、 . %、 . %。培养一段时间天 , . 粗沙上添加不同浓度多糖的发菜细胞生物量情 测定其生物量,以 为对照,进行差异显著性分 况 析处理,其结果见表 。 表 粗沙上添加多糖与 生物量的比较 一目猕辩、望一咖 蕾 舛 舰 矾 注:不同的小写字母分别表示多糖间差异达 . 显著水平;不同的大写字母分别表示浓度间差异达 . 显著水平; 表示对照。 由表 知,同一种多糖不同的浓度与对照组之 间均有显著性差异,均能显著促进发菜细胞生物量的 提高。在多糖添加浓度为 . %时, 种多糖对发菜 细胞的促进作用均最好,细胞生物量均达到最高,其 中海藻酸钠和果胶的促进作用最大,阿拉伯胶次之。 在多糖浓度为 . %时,果胶促进作用最好,海藻酸钠次之,阿拉伯胶最小。在多糖浓度为 . %时,果 时间/ 胶促进作用最好,阿拉伯胶次之,海藻酸钠最小。在 图 粗沙上添加 . %多糖的发菜细胞生物量情况 多糖浓度为. %时,果胶促进作用最好,阿拉伯胶 和海藻酸钠促进作用次之。某一浓度下, 种多糖与 . /培养皿。 ?时, . %的阿拉伯胶 对照组之间均有显著性差异。结果表明,多糖之间, 和 .