ELISA与免疫传感器在大肠杆菌内毒素检测中的应用.pdfVIP

2884 中国卫生检验杂志2011年 12月第21卷第 12期 ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology，Dec2011；Vol21 No12 【微生物检测方法】 ELISA与免疫传感器在大肠杆菌内毒素检测中的应用 郭寅生，郝春慧，刘红艳，黄正 (华中科技大学同济医学院公共卫生学院教育部环境与健康重点实验室，武汉 430030) [摘要】 目的：研究两种基于免疫反应和电化学的简便 、灵敏、特异检测内毒素的新方法。方法：应用ELISA建立PMB — ET—ELISA法和免疫传感器法对大肠杆菌内毒素进行分析 ，并对两种方法检测范围和最低检测限进行分析和比较。 结果：ELISA方法检测精制内毒素范围为 1 ml一1mg／ml，检测大肠杆菌0157：H7范围为 10CFU／ml一10CFU／ml， 相当于内毒素 190 g／ml～2918 g／ml。免疫生物传感器法检测精制内毒素范围为 1 g／ml一1mg／ml；检测大肠杆菌 0157：H7范围为 10CFU／ml～10CFU／ml，相当于内毒素288tLg／ml～1416 ml。结论：建立的ELISA和免疫传感器两 种检测内毒素新方法有效、稳定、可用。 [关键词] ELISA；免疫传感器；大肠杆菌内毒素 [中图分类号] R446．5 [文献标识码] A [文章编号] 1004—8685(2011)12—2884—04 ApplicationofELLSA andimmunosensorindetectionofEscherichiacoliendotoxin GUO n—sheng，HAO Chun—hui，LIUHong—yan，HUANGZheng (MOEKeyLabofEnvironmentandHealth，SchoolofPublicHealth，Ton~iMedicalCollege，HuazhongUniversityofScience＆ Technology，Wuhan430030，China) [Abstract] Objective：Tostudytwoelectrochemicalmethodsforthedetectionofendotoxinbasedonsimpleness，sensitivity， andspecificity．M ethods：EscherichiacoliendotoxinwereanalyzedbyPMB—ET—ELISAandimmunosensor．Moreover，thede— tectionrangeandthedetectionlimitofthetwomehtodswereanalyzedandcompared．Results：WithELLSA (enzyme—linked immunosorbentassay)，thedetectionrangeofrefinedendotoxinwere1 ml一1mg／ml，E．coli0157：H7detectionrange were10 CFU／ml～10 CFU／ml，equivalenttoendotoxin190 ml～2918 g／m1．Whilewithimmunosensors，thedetection rangeofrefinedendotoxinwere1txg／ml～1mg／ml；detectionrangeofEcoli0157：H7were10 CFU／ml一10 CFU／m1．equiv— alenttoendotoxin288 ml～1416 m1．Conclusion：TheELISA andimmunsensorinendotoxindetectionayeeffective，sta- bleandfeasible． [Keywords] ELISA；lmmunosensor；Escherichiacoliendotoxin 内毒素 (Endotoxin，ET)是细胞壁外膜结构 中的脂多糖 家兔热源法是最早 的内毒素检测方法，由于该方法存在 (Lipopolysaceharide，LPS)，它能引起发热、休克、器官损伤等多 定量性差、费时等缺点，有被逐渐淘汰的趋势 I3J。国内外现