北京鸭腔上囊的研究：Ⅶ,B淋巴细胞分化的免疫球蛋白表达.pdfVIP

维普资讯 北京大学学报 (自然科学版)，第26卷，第6期，1990~ Act Selentlarum NaturtIlium UnlversitatisPckineasis，Vo1．26， 6(1990) 北京鸭腔上囊的研究 Ⅶ．B淋 巴细胞分化的免疫球蛋 白表达 罗 苗 王 平 (生物学糸) 摘 要 应甩兔抗鸭 IgM 和 5．7SIgG 血清， 间接免痉荧光法研究北京鸭l垒上囊中B淋巴纽 胞的分化，得到以下结果：(1)B淋巴细胞表面和胞质免疫球蛋白出现的时间：胚胎 11天， CIgM；胚胎15天 SIgM,胚胎18天 SIgGi胚胎 21天 CIgG。 (2) B琳 巴细胞分化可分为 3十阶段．第 1阶段 (胚胎II~15天)，CIgM 淋巴干细胞分化为 SIgM 前淋 巴母细胞；第 2阶段 (胚胎15~21天)，SIgM 前稀巴母细胞分化为SIgM 、SIgG 淋 巴母细胞；第 3阶段 (胚胎21~28天孵出)，SIgG 琳巴母细 胞分化为中 小淋巴细胞，并开始从腔上 囊迁出。 (3)北京鸭腔上囊中B淋巴细胞分化过程与鸡具有平行的时间关系。 ． 关键调 北京鸭，腔上囊；B淋巴细胞分化，免疫球蛋 白 1．引 言 荚干腔上囊中淋巴细胞的分化， 自1952年，1962年 Ackermaa等 的研究后，1974年 Frazier 1975年Olah“、1982年高舜德等人 相继对鸡腔_卜囊淋巴上皮滤抱的发生和淋巴 细胞的分化进行了细胞学研究。1968年 Thorbecke 开始用荧光抗体染色法研究淋 巴细胞分 化中免疫球蛋 白的表达。20年来相继证明了免疫球蛋 白表达的顺序为 IgM—IgG—IgA，IgM 阳性细胞向 IgG阳性细 胞的转化 (1971年 Kineade和 Cooper”J1975年 Lawton 等)， 1979年 Lebaeq 证明免疫球蛋 自在淋巴细胞发育中存在的部位和种类的变化。这些结果说 明B淋 巴细胞免疫球蛋 白存在的种类和变化是分化的一个主要特征 我们在对北京鸭腔上囊 中B淋巴细胞分化的形态学研究的基础上 ””u” ”分离纯化了北京鸭免疫球蛋 白，并制 备了抗血清 同时用间接免疫荧光法，对北京鸭腔上囊主要发育阶段B淋 巴细胞分化过程 中 免疫球蛋 白的表达进行初步探讨，以补充禽类免疫学和比较免疫学基础研究的不足。 2．材 料 和 方 法 实验材料鸭胚和雏鸭取 自北京海淀区肖家河鸭场。11，12 13、15、18、21和25天鸭胚 ’国家 自然科学基金资助项 日 本文 】980年loJq9日收到 维普资讯 第6期 北京鸭腔上囊的研毙 Ⅶ．B淋 巴细胞分化的免疫球蛋白表达 72l 各 2～ 3个； 1天、 1周、2周、 3同和 4周龄雏鸭各 3只。 一 级抗体 兔抗鸭 IgM 和兔抗鸭 5．7SIgG 血清为本实验室制 备。 二级抗体 羊抗兔 IgG荧光 (FITC)抗体诊断血清为北京生物制品研究所商-吊，F／P 1·36。 标本的制备：经 比较试验，参考1978年 Dorsett 的方法，取腔上囊中段经 Bouin 氏 液 固定 20～24h，石蜡切片，厚度 5~6#m，贴片不用粘附剂。免疫荧光染色方法主 要 参 考 I980年王世 中 ：的 方法，稍 作 改 进。 (1)切 片 经二 甲苯 脱蜡，乙醇逐级浸水，在 0．0lmol／／，pH 7．2，PBS缓冲液中浸泡 10rain。 (2)1D倍稀释 小 牛 血 清 37℃温育 3O min，以捌 闭组织对蛋 白质的非特异性吸附。用D．