莱克多巴胺人工抗原的光谱表征及免疫鉴定研究.pdfVIP

莱克多巴胺人工抗原的光谱表征及免疫鉴定研究.pdf

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ScienceandTechnologrofFoodIndustry 生 王 程 莱克多巴胺人工抗原的光谱表征 蓬 及免疫鉴定研究褰篡 程 芬。张 煜,赵肃清 ,林壮森 。黄 洪 (广东工业大学轻工化工学院,广东广州510006) 摘 要 :盐酸莱克多巴胺 (Ractopaminehydrochloride,RCT)是一种 13一肾上腺素受体激动剂 ,即使极低剂量残留对人类 健康也有危害。为了建立简单、快速并适应现场检测的免疫分析方法,必须先合成它的人工抗原并进行鉴定。通过对 莱克多巴胺进行结构修饰 ,用碳二亚胺将结构修饰 了的莱克多巴胺与牛血清蛋 白相偶联 ,经透析得到纯的莱克多巴胺 人工抗原并冷冻干燥备用。结果表明,紫外光谱图中合成的人工抗原的特征吸收峰介于蛋 白质和莱克多巴胺的特征 吸收峰之间;人工抗原红外光谱 图中呈现莱克多巴胺和牛血清蛋 白的红外特征吸收峰 ;通过竞争ELISA实验表明用合 成的人工抗原免疫的Balb/c小鼠血清中产生了莱克多巴胺的抗体,三种方法综合鉴定结果表明,莱克多巴胺人工抗原 合成成功,该人工抗原可以进一步用于制备抗莱克多巴胺的单克隆抗体。 关键词 :盐酸菜克多巴胺 ,人工抗原,光谱 ,免疫,鉴定 Studyonspectralandimmuneidentification ofartificialantigenofractopamine CHENG Fen,ZHANG Kun,ZHAO Su-qing ,LIN Zhuang—sen,HUANG Hong (FacultyofChemicalEngineeringandLightIndustry,GuangdongUniversityofTechnology,Guangzhou510006,China) Abstract:Ractopamine(RCT)isa13-adrenergicreceptoragonist.BecausetraceresidualamountofRCTmightbe harmfuIlOhumanbeing.instrumentanalysismethodshavebeendevelopedforthedeterminationofRCT.Butthese inslrumentanalysismethodsrequirecomplicatedpre—treatmentstepsanddidnotsuitrapidprocessingofmultiple samples.Immunochromatographyassaymethod can provideinsitumonitoringoftraceRCTinFoods.Inorderto buildthesimpleandfastimmunochromatographyassaymethod,itisnecessarytosynthesizeandidentifyartificial antigenofRCTfirstly.ThemodifiedRCTwasconjugatedwiththecarrierofbovineserumalbumin(BSA)byEDC · HCI,afterdialyzed,thesynthesizedartificialantigenofRCTwaslyophilized,andthen storedat-20oC.Theresults showedthatUVspectrum ofartificialantigenofRCT hadoneabsorbanceband at276nm whichwasbetweenthe characteristicabsorhance bandofBSA andRCT.TheIRspectrum absorbancebandsofBSA appearedonthetR spectrum graphofartificialantigenofRCT,moreover,shrinkedvibr

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