石油降解菌群构建的研究.pdfVIP

油 气 田 环 境 保 护 ENVIRONMENTAIPROTECTIONOFOII GASFIEIDS 石油降解菌群构建的研究 张海玲 杨 琴 赵 敏 (中国；h-油长庆油 田公司油X-工艺研 究院) 摘 要 通过初步有序组合方法将筛选得到的原油降解菌株 A5、A6、YA5、YA6，十六烷降解菌株 B3、 YB3，萘 降解菌株 C3、YC3，石蜡 降解菌株及表面活性剂菌株 D4共 9株优 良菌株进行组合后分别做液态原油降 解实验 ，排除拮抗效应 ，优化互生效应。结果发现 ：A5、YB3、YC3、D4配伍组合为最佳方案，此时的原油降解率 达到 58．6 ，再通过正交法确定这四种菌株的配比，结果发现：当A5：YB3：YC3：D4为 0．5：1：0．1：0．5 时，对原油的降解效率最高为61．3 。 关键词 石油降解茵；菌群构建；正交实验；含油率；降解率 中图分类号：X172 文献标识码 ：A 文章编号：1005—3158(2013)03—0019—03 0 弓l 言 YB3，萘降解菌有 C3、YC3，石蜡降解菌有 D4，表面活 性剂产生菌 D4。种子培养基 ：牛 肉膏 3g，NaNO。1 石油是一种复杂的混合物 ，不 同品质 的原油其组 g，(NH4)2SO41g，Na2HPO41．2g，KH2PO41g， 成成分差别很大 ，石油烃类化合物组成成分的差异影 MgSO4·7H2O0．01g，CaC120．002g，调 pH值为 响其生物降解率 ¨1]，且每种微生物所利用 的石油烃也 7．2，分装 100mL／250mL三角锥瓶 中，121℃湿热法 有差异 ，现已发现 70个属、200多种微生物能够氧化 灭菌 20rain。石油培养基 ：原油2g，硝酸铵 0．3g，磷 降解一种或多种石油烃类 。而菌群构建可 以组合多 酸二氢钠 0．1g，磷酸二氢钾 0．1g，硫酸镁 0．1g，氯 个单种微生物降解能力形成一个完善的降解系统，集 化钙0．005g，氯化铁 0．003g，水 100mI，pH值约为 合多种酶促活性 ，扩大底物范 围，因此利用菌群的协 7，置于灭菌锅中，121。C灭菌 20rain。培养条件 ：30℃ 同作用至关重要l2]。菌群生物强化 的优势在于组成 摇床振荡培养 ，转速 120r／mini恒温培养箱 3O℃培养 。 菌群的优势菌种在生理功能和遗传信息上的互补性 ， 1．2组合 方案 总体上更高效 ，更稳定、配置更合理 、功能更完善的菌 群替代活性较低的单种和土著菌群 ，从而提高降解活 前期实验所获得 的优 良菌株 中原油降解菌有 性，促进生物降解_3]。目前对菌群的研究还停 留在初 A5、A6、YA5、YA6，十六烷 降解菌有 B3、YB3，萘 降 步阶段 ，即将几种优势菌简单地混合 ，组建菌群 的过 解菌有 C3、YC3，石蜡降解菌有 D4，表面活性剂产生 程毫无规律。这样构成的菌群很难发挥其最大作用 ， 菌 D4。首先将不 同功能的菌株组合 ，组合方案见表 有时甚至 因为种 间的抑制作用而产生负面效应 ]。 1，进行液态原油降解实验 ，选 出降解效果好的一组， 研究的菌群构建正是要寻找一个行之有效 的构建方