弓形虫转基因学研究进展.pdfVIP

中国寄生虫学与寄生虫病杂志2011年 12月第 29卷第6期 ChinJParasitolParasitDisDec．2011，Vo1．29，No．6 ·469 · 文章编号 ：1000．7423(2011)一06—0469—04 【综述 】 弓形虫转基因学研究进展 张彦雷 ，张厚双，周金林 【提要】 转基因技术在弓形虫的运用加速了对 弓形虫功能基因组学的研究。本文对转基因弓形虫载体的构建、转 基因方法和转基因弓形虫技术在 弓形虫研究 中的应用进展加以综述 。 【关键词】 刚地弓形虫；转基因学；电转化；应用 中图分类号 ：R382．5 文献标识码 ：A Progressin Transgenicson Toxoplasmagondii ZHANG Yan-lei，ZHANG Hou—shuang，ZHOU Jin—lin (ShanghaiVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Shanghai200241，China) 【Abstract】 TheapplicationoftransgeneticsinToxoplasmagondiiresearchfacilitatesitsgeneticanalysis． This article reviews the progress in construction oftransgenetic vector, the protocol of electroporation and application of transgenicsintheresearch of gondii． K【eywords】 Toxoplasmagondii；Transgenetics；Electroporation；Application Supposed byNaturalScienceFundofShanghai (No．10ZR1437200) andBasicScientificResearch GrantofCentralPublicWelfare Research Institutes (No．201oJB01) Correspondingauthor，E-mail：jinlinzhou@shvri．ac．cn 刚地 弓形虫 (Toxoplasmagondii)是顶复 门的一种 CAT作为报告基 因，体外构建转基 因载体 ，并利用 专性胞 内寄生虫 ，入侵有核细胞 ，几乎可以感染所有 CAT阳性株具有氯霉素抗性来检测是否外源基因在 弓 温血脊椎动物 …。虽然多数人感染 弓形虫是 隐性感 形虫体 内表达 。Donald等E4]将 DHFS．TS基 因进行 了 染 ，但可引起孕妇流产 、胎儿死亡 ，以及艾滋病患者 单位点和组合位点突变 ，利用 Soldati等[q报道 的 的致死性脑炎[2]。作为临床医学和兽医学重要 的病原 SAG1一CAT作为报告基因，将突变后 的DHFS．TS构建 体 ．弓形虫体外易培养 、基 因易操作 ，是研究胞 内寄 到 pBluescript载体上经转化 弓形虫后 ．CAT阳性株 生虫的一个很好的模型[3]。 进行 乙胺嘧啶筛选 ．得到了乙胺嘧啶抗性 弓形虫 ，之 研究 弓形虫的分子遗传工具在 20世纪末得到了 后 DHFS—TS被作为弓形虫稳定转化的一种筛选标记 。 迅速发展 ．体外短时和稳定转化 弓形虫已成为一种常 1．1．2 营养缺陷型标记 目前 ．营养缺陷标记成功应 规手段 。内源性或是异源性的蛋 白可通过该方式在 弓 用在 弓形虫转基