脂肪分化相关蛋白促进RAW264.7细胞内酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1高表达.pdfVIP

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CN43·1262/R中国动脉硬化杂志2009年第 17卷第 8期 643 [文章编号] 1007-3949(2009)17-08-0643-05 ·实验研究 · 脂肪分化相关蛋白促进 RAW264.7细胞内酰基辅酶A: 胆固醇酰基转移酶 1高表达 乔运成 。黄谙非 ,田国平 ,刘晓辉 。袁中华 (1.河南省平舆县人 民医院心血管内科,河南省平舆县463400; 2.深圳市西丽人民医院病理科,广东省深圳市518050; 3.南华大学附属第二医院心血管内科,湖南省衡阳市421001; 4.南华大学心血管病研究所 动脉硬化学湖南省重点实验室,湖南省衡 阳市421001) [关键词] 脂肪分化相关蛋白;酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶l;RAW264.7细胞;动脉粥样硬化 [摘 要] 目的 观察高表达脂肪分化相关蛋白细胞内酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶 1表达的变化,阐明脂肪 分化相关蛋白促进细胞内脂质蓄积的机制。方法 构建的pQCXIP—HA—Adi逆转录病毒载体转染PA317包装细胞, 获得 pQCXIP.HA.Adi逆转录病毒。用病毒感染RAW264.7细胞 ,Puromycin筛选后获得稳定高表达脂肪分化相关 蛋 白的RAW246 .7细胞株 。应用逆转录聚合酶链反应和免疫 印迹法检测经感染后细胞 内脂肪分化相关蛋 白和酰 基辅酶A:胆固醇酰基转移酶 1的表达。并应用阿托伐他汀处理高表达脂肪分化相关蛋白的RAW264.7细胞,观 察酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶 1表达的改变。结果 用pQCXIP—HA—Adi逆转录病毒感染RAW264.7细胞后 , 脂肪分化相关蛋白和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶 1mRNA和蛋 白表达明显升高,而对照组表达无明显变化。 加入阿托伐他汀后 ,即在去除底物对酰基辅酶A:胆 固醇酰基转移酶 l表达影响的情况下,高表达脂肪分化相关蛋 白细胞内酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶 1表达仍升高。结论 高表达脂肪分化相关蛋白可明显上调 RAW264.7 细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶 1的表达。 [中图分类号] R363 [文献标识码] A AdipophilinFacilitateAcyl-CoenzymeA: CholesterolAcyltransferase1Expression inRAW 264.7Cells QIAOYun—Cheng。HUANGAn—Fei2。TIANGuo—Ping。LIUXiao-Hui,andYUANZhong—Hua4 (1.DepartmentofCardiovascularMedicine.PingyuRenminHospital,Pingyu463400,China;2.DepartmentofPathology,XiliRenminHos— pital,Shenzhen518050,China;3.DepartmentofCardiovascularMedicine,theSecondAffliatedHospitalofUniversityofSouthChina, Hengyang421001,China;4.1nsititueofCardiovascularDue~e,UniversityofSomhChina KeyLabforArterioscleroalgyofHunanProv- ince。Hengyang421001,China) [KEYWORDS] Adipophilin;Acyl—CoenzymeA:CholesterolAcyhransferase1; RAW264.7Cells; Atheroselero- sis [ABSTRACT] Aim Toexplorewhetheradipophilinaffectstheexpressionofac

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