还脑益聪方对认知功能障碍大鼠认知功能及海马Bcl-2,Bax蛋白表达的影响.pdfVIP

第 34卷第20期 中国中药杂志 Vo1．34．Issue 20 2009年 1O月 China,JournalofCh|nl~eMatetta№ dic氇 October，2009 还脑益聪方对认知功能障碍大鼠认知功能及 海马 Bc1．2，Bax蛋 白表达的影响 李浩，姚明江 ，徐立，刘剑刚，赵文明 (中国中医科学院 西苑医院，北京 100091) [摘要] 目的：观察还脑益聪方对复合因素所致大鼠认知功能障碍模型认知功能、海马区细胞凋亡情况及相关基因表达 的干预作用。方法：sD大鼠60只，按随机方法分为中高组、中低组、阳性组、模型组及空白组。空白组每 日皮下注射等量生理 盐水，共 l0周 ，并饲喂普通饲料至第 1O周末 ；其他各组每日皮下注射D一半乳糖50mg·kg 体重，共 10周，并于第5周开始同 时给予半高脂饲料饲喂。第 7周开始，中药高、低剂量组均给予还脑益聪方混悬液0．01mL·g 体重灌胃(用药量分别为生 药 14g·kg 体重及生药7g·kg 体重)；阳性药对照组给予盐酸多奈哌齐混悬液0．OlmL·g 体重灌胃(用药量为0．4mg · kg 体重)；模型与空白对照组均给予等量蒸馏水；灌 胃每 日1次至第 10周末。观察各组动物行为学的变化海马区细胞凋 亡情况及凋亡相关蛋白Bcl一2，Bax的变化。结果：水迷宫试验显示，模型组潜伏期明显延长，穿台次数明显减少，和空白组比 较有显著差异 (P0．05，P0．01)，中高组及阳性组穿台次数与模型组比较，有显著性差异 (P0．05，P0．01)；模型组海马 凋亡细胞数量明显增加，和空白组比较有显著差异 (P0．01)，中高组、中低组及阳性组均可减少海 马细胞凋亡数量，提高 Bcl-2与Bax的比值，差异有统计学意义(P0．O1)。结论：还脑益聪方能改善认知功能障碍大鼠学习记忆能力，通过抑制海 马细胞凋亡，调节相关基因表达，加速细胞修复，保护损伤脑组织作用，可能是其临床效应的部分途径。 [关键词] 认知功能障碍；细胞凋亡；海马；还脑益聪方；TUNEL技术 认知功能障碍 (又为认知功能衰退、认知功能 基因表达的影响，探讨其作用机制。 缺损或认知残疾)泛指 由各种原因(从生理性老化 1 材料与方法 到意识障碍)导致的不同程度的认知功能损害的临 1．1 试剂 床综合征，重者如各种类型痴呆，轻者如轻度认知功 POD凋亡检测试剂盒 ( 蜡，天津濒洋生物制 能障碍等…。随着我国逐渐进入老龄化社会 ，认知 品科技有限公司)；Bcl一2，Bax免疫组化试剂盒(武 功能障碍的人 口正逐年增加，许多中老年人及其家 汉博士德生物工程有限公 司)；D一半乳糖 (Sigma公 人正在经受认知功能障碍所带来的痛苦，同时也为 司，G0625)；半高脂饲料 (5％猪油+0．5％胆固醇+ 整个社会带来巨大的经济负担 j。神经细胞的凋 5％蛋黄粉 +89．5％基础饲料，北京科澳协力饲料有 亡在神经退行性疾病中起着主导性作用，凋亡过程 限公司)；还脑益聪方水煎剂 (何首乌，人参，石菖 的诱导因素如A ，氧化损伤，低能量代谢均存在于 蒲，黄连，川芎等组成，中国中医科学院西苑医院制 认知功能障碍脑组织中 。海马组织直接参与信 剂中心)；盐酸多奈哌齐片(安理 申，卫材 (中国)药 息的储存和回忆，是认知功能障碍研究领域中涉及 业有限公司，5rag／片 ，批号060609A)。 最多的脑区之一。本研究基于还脑益聪方对老年轻 1．2 动物模型制备及1二预 认知功能损害有较好临床疗效的基础上 ，以D．半 采用D一半乳糖联合半高脂饲料造模，该模型已 乳糖联合半高脂饲