自体脂肪间充质干细胞移植促进声带修复再生的实验研究胡蓉.pdfVIP

自体脂肪间充质干细胞移植促进声带修复再生的实验研究 胡蓉 徐文 范尔钟 【摘要】目的 探讨自体脂肪间充质干细胞移植入损伤声带后的生长分布及对声带固有层及 其主要细胞外基质变化的影响特点。方法 对 34 只实验用兔（68 侧声带）的 53 侧声带进行 全麻支撑喉镜下声带锐性损伤。分离培养、鉴定及定向诱导 20 只实验用兔脂肪间充质干细 胞。将自体脂肪间充质干细胞植入 20 侧损伤声带后，示踪观察脂肪间充质干细胞在声带固 有层内的生长分布；同时以单纯支架（胶原或透明质酸凝胶）植入 18侧受损声带（胶原 10 侧，透明质酸 8 侧）及单纯损伤 15侧声带作为对照组。术后 15 d～12个月时采用 HE 染色、 Masson 染色、Alcian Blue 染色及免疫组化染色观察声带形态学变化及声带固有层胶原、透 明质酸、纤维连接蛋白的含量及分布变化。结果 脂肪间充质干细胞呈梭形贴壁生长，具有 多向分化潜能，植入损伤兔声带后持续分布于声带固有层。损伤声带在脂肪间充质干细胞植 入 6 个月时形态接近正常，12 个月时部分组织学结构类似正常；声带细胞外基质中的胶原 于植入 3 个月内含量有增高趋势，无序分布于固有层，后逐渐减少至正常水平附近，12 个 月时部分分布略显不规则；透明质酸于植入 40 d 含量亦有增高趋势，分布于固有层各层，6 个月含量减至正常水平附近，局限于固有层浅中层；纤维连接蛋白于植入后始终在固有层内 散在分布，含量在 40 d内有增高趋势，后逐渐减少，12 个月时含量接近正常。单纯声带损 伤 3 个月后局部开始出现瘢痕挛缩，以胶原纤维为主的大量纤维组织增生，12 个月时仍紊 乱分布于声带固有层各层。单纯支架植入组变化介于二者之间。结论 脂肪间充质干细胞植 入兔损伤声带后具有促进声带细胞外基质分泌、合理分布及部分有序化排列的功能，具有促 进声带修复再生的作用。　 【关键词】间质干细胞；脂肪组织；声带；创伤与损伤；再生；模型，动物;组织工程 Characterization of vocal fold regeneration after adipose-derived mesenchymal stem cells implanting HU Rong*, XU Wen, FAN Er-zhong. *Department of Otorhinolaryngology Head and Neck Surgery, Beijing Tongren Hospital,Capital Medical University,Key Laboratory of Otorhinolaryngology Head and Neck Surgery, Ministry of Education, Beijing 100730, China 　 Corresponding author: XU Wen, Email: entwen@ 　 【Abstract 】Objective To investigate the treatment for injured vocal folds by implanting autologous adipose-derived mesenchymal stem cells (ADSC), and to observe the characteristics of lamina propria of the vocal folds and its major extracellular matrix (ECM), as well as the growth features of ADSC. Methods The lamina propria was injured by localized resection in fifty-three vocal folds of thirty-four rabbits.Isolation, culture and identification of ADSC were performed in twenty rabbits.Three to five days after vocal folds injury, autogeneic ADSC were implanted into the injured vocal folds.As control, scaffolds (collagen or hyaluronic acid) and none were injected