胃癌组织中微管聚合蛋白的表达及意义.pdfVIP

山东医药2011年第 51卷第 35期 · 临床研 究 · 胃癌组织中微管聚合蛋 白的表达及意义 潘理会 ，李春辉 ，张德力 (1承德医学院，河北承德 067000；2承德医学院附属医院) 摘要：目的 探讨 胃癌组织中微管聚合蛋白(Tau蛋白)的表达及意义。方法 分别采用 RT—PCR法和免疫组 化法检测60例 胃癌组织 (观察组)和 10份正常胃组织 (对照组)中TaumRNA和蛋白表达情况。结果 观察组Tau mRNA和蛋 白表达明显高于对照组 (P均 0．05)；胃癌组织中高中分化者TaumRNA和蛋 白的表达明显低于低分 化者 ，无淋巴结转移者明显低于有淋巴结转移者 (P均 0．05)。结论 Tau蛋 白与 胃癌的发生、发展过程密切相 关，可作为 胃癌靶向治疗的靶点。 关键词：胃肿瘤，胃癌；微管聚合蛋白 中图分类号：R735．2 文献标志码 ：B 文章编号：1002-266X(2011)35-0045-02 微管是细胞有丝分裂期纺锤体的主要成分，可 标本 50～100mg加入 1mlTrizol提取液 ，室温下充 使细胞分裂顺利进行，为癌细胞无限增殖提供条件， 分匀浆，离心，取上清提取RNA样本按试剂盒说明 微管相关蛋 白(MAP)是结合于微管上的非微管结 合成 cDNA。取PCR产物 10 l用 1．5％琼脂糖凝 构蛋 白，参与微管的组装 ，维持微管的稳定和微管与 胶 电泳，经 EB染色后，在紫外荧光数字成像仪下照 其它骨架纤维问的连接；Tau蛋 白即微管聚合蛋 白， 像并进行光密度定量分析。以每例 Tau蛋白与其相 与微管结合能诱导微管成束，增强微管的稳定性，可 应 B—actin扩增产物条带累积光密度 (IOD)的比值 能会加速恶性肿瘤的进展 。2008年 12月 ～2010年 作为 TaumRNA的相对表达量。 3月，我们检测 了60例 胃癌患者 胃癌组织中Tau蛋 1．2．2 Tau蛋 白检测 采用免疫组织化学方法 。 白的表达 ，探讨其在 胃癌发生、发展过程中的作用。 将组织标本用福而马林固定，石蜡包埋，4tzm连续 1 资料与方法 切片，微波修复抗原，进行免疫组织化学染色。Tau 1．1 材料 手术切除经病理证实的胃癌组织标本 蛋白阳性信号表达于细胞质。在染色均匀的区域， 60份(观察组)，患者男49例，女 11例 ；年龄43～77 选取 5个高倍镜视野 (×400)进行观察 。按阳性细 (58．34-10．0)岁；高中分化28例，低分化 32例；无 胞百分率 (A值)评分：25％为1分，25％ ～50％为 淋巴结转移25例，有淋 巴结转移 35例。另取 10份 2分，50％为 3分；按染色强度 (B值)评分：不着 正常 胃组织标本 (距肿瘤 10cm 以上)作为对照组 。 色为0分，浅棕黄色为 1分，棕黄色为2分，棕褐色 AMV第一链 cDNA合成试剂盒购 自上海生工生物 为3分 。A值与B值相加判断结果，2分为阳性。 工程技术服务有 限公司(SK2030)；引物由上海生工 1．3 统计学方法 采用 SPSS11．5统计软件。计量 生物工程技术服务有限公司合成；50bpDNALad． 资料用 ±s表示，采用两独立样本 t检验；计数资料 der购 自北京天根生化有 限公司(MD108)；Trizol购 采用两独立样本秩和检验。P≤0．05为差异有统计 自Invitrogen公 司；溴化 乙锭购 自美 国Promega公 学意义。 司；氯仿、异丙醇、无水 乙醇、EDTA、Tris一乙酸、Tris一 2 结果 硼酸、NaOH、DEPC、琼脂糖等常规试剂购 自北京化 观察组及对照组 TaumRNA相对含量分别为 0．78-40．08、0．53-40．01(P0．05)；Tau蛋 白阳性 学试剂公司。 1．2 检测