新颖氮杂大环Mn-SOD模拟物的合成与表征.docVIP

新颖氮杂大环Mn-SOD模拟物的合成与表征 摘要: 以3，5-二乙酰基-1-氢-1，2，4-三氮唑、MnCl2·4H2O、二乙烯三胺为原料，用模板法合成氮杂大环Mn-SOD模拟物，测其红外光谱及分子结构，并对其结构进行了分析。 关键词: 超氧化物歧化酶(SOD)； Mn(II)； 3，5-二乙酰基-1-氢-1，2，4-三氮唑；模拟物 1. 前言 超氧离子自由基O2-生物在利用氧的过程中产生的一种活性氧物种,它参与生物体内的某些生理生化过程,但同时它对细胞有毒,尤其是在高浓度情况下。幸而细胞具有完善的自我防御机制,能及时将过多的O2-歧化而清除掉: 催化O2-歧化为O2和H2O2这一过程的酶称为超氧化物歧化酶(superoxidedismutase),即SOD它是机体内超氧自由基的天然清除剂,它能催化O2-歧化为O2和H2O2,从而使机体内的O2-控制在稳定而且有利无害的低质量浓度范围内。.因此SOD对炎症、缺血再灌注损伤、辐射损伤等均有临床疗效,还可减少抗癌药物对细胞和心脏的毒副作用。在SOD家族中，MnSOD与其他SOD相比具有寿命长、分子量小、抗炎和抗辐射作用等优点,而且锰的毒性较铜、铁低，因此在医用和临床应用中具有很大潜力.但是,MnSOD主要分布于线粒体以及菌类中,分离纯化方法繁琐,含量少,价格昂贵.故具有天然生物活性的小分子MnSOD模拟化合物成为当今世界热门研究课题【1－2】作为.-清除剂,在防辐射、抗衰老、防治肿瘤等方面显示出独特的功能,目前recombinant SOD 重组SOD）已进入Ⅱ期临床。国内对SOD的研究已进行了十余年，并取得了一定的成绩，rSOD已进人Ⅰ期临床。我省的生物医药行业发展非常迅速，目前已有一些企业正在开发、生产有关SOD的产品，它们将从动物血液中提取出来的天然SOD应用于护肤品、食品、饮料等行业。含有SOD的化妆护肤品倍受女士的青，其产品具有很强的竞争力。如市场上销售的奥琪、大宝、紫罗兰、芳等高级护肤化妆品，都因添加了SOD而成为抢手货[3]。首先是获取和制备比天然SOD要简单得多。天然SOD要从人或其他生物中提取，这就决定了天然SOD的提取必然困难重重，而且产量不高。而模拟SOD可以从化学方法来人工合成，其物质和能量消耗低，且产量不会受到限制。其次，天然SOD作为一种生物大分子，在进入体内时存在着诸如进入细胞能力弱；细胞渗透性差；在血中半衰期短（在人体中SOD只是在很短时间内稳定，其半衰期为分钟级）；不能口服；价格昂贵等缺点[4]。另外，对于非人体SOD，还存在着造成免疫损伤的可能。所以人们把目光投向了SOD模拟物，尤其是低分子量模拟物上。如果能用人工合成的SOD模拟物替代天然SOD，可大幅度降低产品的成本，大大提升这类产品的市场竞争力。更重要的是，从动物血液中提取的天然SOD作为超氧阴离子清除剂，目前仅能作为一种酶的添加剂，而不能用作为药物[5][6]。如果通过研究，能筛选出具有高SOD活性、且低毒甚至可供口服使用的人工SOD模拟物作为药物应用于临床，则可大大促进我省生物医药工业的发展，从而取得良好的社会效益和经济效益。 纵观近年来对SOD的模拟研究[7][8][9]，我们可以看出以下一些特点：首先，对SOD的模拟研究的重点，从对Cu,Zn-SOD的模拟转移到对Mn-SOD的模拟。这是因为游离的Cu2+在生物体系内有较高的毒性，而Mn在生物体系内毒性较小。从模拟研究的药用安全角度考虑，Mn-SOD模拟物的应用前景比较大。其次，模拟研究的重心从单纯SOD酶中心结构的模拟到SOD酶整体活性的模拟转移，即更注重模拟物整体在生物体系内活性的研究。同时，在对SOD模拟研究的整个进程当中，无论是对活性中心还是对酶的整体的模拟，绝大部分都是采用含氮的杂环化合物作为配体，其原因一方面可能与其它元素杂环化合物在生物体内的安全性有关，另一方面也可能与其它元素杂环化合物在生物体系内的活性有关。 为此我们设计并合成以3，5--1，2，4Mn(II)为模板金属离子，是因为Mn(Ⅱ)的氮杂大环配合物具有毒性小，活性好等优越性，可望成为新型抗炎药物。由于时间所限，对于模拟物的SOD活性测定，则有待于以后的进一步研究和讨论。 2. 实验部分 2.1 试剂和仪器 试剂：L-乳酸（ACROS）、水合肼（A.R）、KMnO4 （A.R）、NaNO2（A.R）、HCl（6mol/L）、乙腈（A.R）、NaHCO3、二乙烯三胺（A.R）、无水乙醇（A.R）、无水甲醇（A.R）、丙酮（A.R）、氯化锰（MnCl2·4H2O,A.R）、二次亚沸蒸馏水、无水乙醚（A.R）。 仪器：Bruker Tensor27红外光谱仪（KBr压片）Rigaku RAXIS RAPID衍射仪 2.2 配合物