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中国科技论文在线 microRNA 在乳腺肿瘤患者组织和血清中表达的变化 和相关性1 a b a,** a,** 王凤军 ，郑智国 ，丁先锋 ，郭江峰 a 浙江理工大学生命科学院生物工程研究所，杭州 (310018) b 浙江省肿瘤医院肿瘤研究所，杭州 (310022) E-mail ：wfj0808@126.com 摘 要：MicroRNAs （miRNAs ）在肿瘤发生与发展过程中呈现出不同的表达水平，具有筛 查和诊断乳腺肿瘤并对治疗方案的选择和预后分析具有潜在的指示作用。目前普遍共识的癌 症特异性的miRNA 表达谱的研究仍只局限于肿瘤组织样本中，而血清作为生物检测样本， 具有取材方便，无创伤性，可连续体外检测的优点，且血清miRNA 的高度稳定性也使得病 人的实际值与实验的测试值相当吻合。本文首先提取48 例乳腺肿瘤患者的组织和血清样本 以及20 例健康志愿者血清中的总RNA ，利用荧光定量技术系统分析与乳腺肿瘤极其相关的 目标miRNA （miRNA-21, 106a, 126, 155, 199a and 335 ）在乳腺组织和血清中的差异性表达 情况。发现目标miRNA 在乳腺肿瘤组织和血清中的表达均呈现出显著的差异性，并在乳腺 肿瘤组织和血清中的表达水平具有显著的相关性（R2=0.853 ）。其中miR-21 ，miR-106a 和 miR-155 在乳腺癌组织和癌血清样本中呈现出显著的高表达，而 miR-126 ，miR-199a 和 miR-335 则显著低表达（P0.05 ）。此外，目标miRNA 还分别与不同的乳腺肿瘤的临床病 理特征密切相关，在组织学和血清学水平上均具有一定的指示作用。这为疾病特异性miRNA 表达谱可作为肿瘤检测，诊断及治疗的血清学分子标记物提供一种新的理论和实验基础。 关键词：microRNA ；乳腺肿瘤；血清；分子标记物 1. 引言 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，具有高度异质性，组织学形态多样性，与遗传和环境 因素均密切相关。虽然在过去的10 年内，早期诊断及辅助化疗和激素治疗使得乳腺癌的死 亡率每年以2.3%递减，但仍属于发病率和死亡率最高的女性恶性肿瘤[1, 2] 。2008 年美国约 有67770 新增乳腺癌病例，全世界每年约有130 万妇女发现乳腺癌，有50 万妇女死于乳腺 癌[3, 4] 。我国女性乳腺癌发病率为50 个/10 万人，每年还正在以3%的速度递增，居各类癌 症之首，并导致48164 人死亡。过去25 年，在西方国家此病发病率增加了25% ，而在我国 的增长已高达96%[5] 。 最新数据显示肿瘤组织普遍具有特征性的miRNA 表达谱，能够作为癌症的生物学标志。 Calin 等通过分析miRNA 在染色体上的定位与肿瘤发生的关系，发现186 例miRNA 基因中 15 个miRNA 定位于 10 个与人类乳腺癌相关的缺失区[6] 。Iorio 等运用miRNA 基因芯片及 Northern 杂交等方法对76 例乳腺癌样本和 10 例乳腺正常标本进行miRNA 表达谱分析，发 现29 种miRNA 的表达有显著变化，且有15 种miRNA 可以明确区分肿瘤或正常乳腺样本， 其中miR-10b 、125b 和145 在大多数乳腺癌组织和细胞中显著低表达，而miR-21 和miR-155 表达量则明显下降[7] 。这表明在肿瘤发生与发展过程中，其癌基因与抑癌基因作用的miRNA 都发挥着至关重要的调控作用。此外也揭示这些miRNA 与乳腺肿瘤的分级、分期、血管侵 袭性及肿瘤细胞增殖和雌、孕激素的表达等临床病理指数均相关。Lu 等人运用基于微球的 更高敏感度的miRNA 分析方法分析20 种癌症后，发现每一种癌症均有一个特征性的miRNA 表达谱，大多数低分化肿瘤也可根据其 miRNA 的表达水平确定其起源的组织或器官[8, 9] 。 * 国家“863”计划资助项目(