动物细胞大规模培养系统要求和类型.pdfVIP

专论 与综述 动物细胞大规模培养系统要求和类型 朱庆虎 ，陈 弘 ，刘兰刚 ，康二勇 ，秦红丽 (1．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨 150001； 2．内蒙古乌兰察布市动物疾病预防控制中心。乌兰察布 012000； 3．武川县农村改水办公室，武川 011700； 4．天津市天农大生物技术发展有限公司。天津 300402) DOI：10．3969／J．ISSN．1671-6027．2010．11．003 动物细胞培养是生产许多临床和医学上重要生物制品 扩大生产等。 的一种必不可少的方法，这些生物制品包括疫苗、干扰素、激 1．1．5 监视控制 自动化，便于大规模培养控制。 素、生长因子和单克隆抗体等 ，既推动了生物学和医学的发 根据上述要求，研制一台理想的细胞培养系统需要多学 展，又带来了巨大的社会效益和经济效益。然而，体外大规模 科的技术共同研究、设计，并与生产部门密切合作才能达到 繁殖动物细胞要比细菌繁殖困难得多 ，如细菌 、酵母菌的细 要求。 胞壁厚 ，能耐受搅拌，不易破碎，营养要求低，生长条件易于 1．2 细胞椿(系)要求 控制，增殖周期短，产品的产量也高。而动物细胞膜薄而娇 1．2．1细胞株(系)在体外生长时要保持良好的生长速率和分 嫩、易碎，对营养要求高，大多数细胞必须贴壁附着生长。而 泌功能。 且产物往往需要破碎细胞释出来，再经浓缩 、纯化等复杂工 1．2．2 为了保持高产稳产的细胞株(系)，应该定期进行筛选 艺，而使产品的得率受到损失。 工作。 常规培养动物细胞的方法是用人工合成培养液加上一 1．2．3 支原体对动物细胞培养威胁最大，它们的感染力很高 定量的小牛血清，将细胞放在不同的容器中进行培养，如微 又不易被检测。因此，细胞在使用前必须经过严格的检测。 孑L板、培养皿以及各种培养瓶等。一船培养容器的体积很小， 1．2．4 为了防止意外事故发生，应将没有支原体污染的细胞 最大培养体积为 l～2L。用这种方法培养的细胞所分泌或产 定期留样进行低温保存。 出的产物是有限的，无法满足实验研究、应用研究和产业化 1．2．5 为了减少血清用量 ，要逐步驯化细胞 ，使其适应于低 生产的需要 ，而且容易导致产品批问差大 ，而且操作劳动强 血清或无血清培养。 度大。应用细胞工程技术，建立大规模细胞培养系统生产各 1．3 培养液要求 种生物活性物质，是一种比较经济可靠的技术。为了培养规 1．3．1 根据所采用的不同细胞株(系)，选用相应的宜于细胞 模的进一步扩大、优化细胞培养环境、提高产品的产出率与 生长的培养液。 保证其质量，动物细胞大规模培养技术已成为各生产企业发 1．3．2 使用低m清或无血清培养液。大规模培养细胞的培养 展至关重要的环节。具有代表性的有机械搅拌式培养系统、 液中，血清用量大，质量不易控制，生产成本也高，且使产品 气升式深层培养系统、微载体培养系统、微囊培养系统、大载 的后加工增加了一定的难度。为此，可尝试低血清或无血清 体培养系统以及中空纤维培养系统，它们具有不同的技术特 培养液。 点，但仍需不断完善。 1．3．3 大规模培养对培养的物质要求极高，在培养液制备时 1 大规模细胞体外培养系统的基本要求 必须采用高纯度的水。 1．1 培养系统的设备要求 t．4 细胞生长状况控制 大规模培养系统是集中多种高技术含量的机电一体化系 1．4．1 温度控制 动物细胞培养对温度波动的敏感性很大。 统，不能简单的认