水稻种胚特异性启动子OsESP1的克隆及其表达特性.pdfVIP

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2011，37(10)：1904—1909 http：／／www．chinacrops．org／zwxb／ ISSN 0496—3490；CODEN TSHPA9 E—mail：xbzw@china-jou蛐a1．net．cn s．、 Doh 10．3724／SP．J．1006．2011．01904 研究简报 S ∽ ∽ 水稻种胚特异性启动子OsESP1的克隆及其表达特性 房孝 良1,2,3 刘 炜 ，2， 安 静 王庆国 2 山东省农业科学院高新技术研究中心 ／山东省作物遗传改 良与生物技术重点实验室，山东济南 250100；农业部黄淮海作物遗传改 良与生物 技术重点开放实验室，山东济南 250100；山东师范大学生命科学学院，山东济南 250014 摘 要：以水稻品种 “中花 11”基因组 DNA为模板，通过 PCR的方法，对水稻基因OsESG1上游调控序列扩增，获得 长度约为 1．4kh的特异性条带，命名为 OsESPI。以OsESP1与带有 GUS报告基因的植物表达载体连接，经农杆菌 介导转化获得转基因水稻阳性植株。结合组织化学染色法，检测 GUS报告基 因的表达特性，结果表明，由 OsESP1 所调控的GUS报告基因仅在水稻种胚中特异表达，而在其他组织中均未被检测到，初步证 明OsESP1为水稻种胚特 异性启动子 。 关键词：水稻；种胚特异性启动子；表达特性分析；GUS报告基因 IsolationandCharacterizationofanEmbryo．specificPromoterOsESP1from Rice FANGXiao．Liang，一，LIUWei，’’，ANJing，andWANGQing．Gun High-TechResearchCenter，ShandongAcademyofAgriculturalSciences／KeyLaboratoryforGeneticImprovementofCropAnimalandPoultry ofShandongProvince，Jinan250100，China； KeyLaboratoryofCropGeneticImprovementandBiotechnology，Huanghuaihai，MinistryofAgricul— ture，Jinan250100，China；CollegeofLifeSciences，ShandongNormalUniversity，Jinan250014，China Abstract：Apairofspecificprimersweredesignedaccordingtothe5upstream regulatorysequenceofricegeneOsESGI．anda1．4 kbfragementnamedOsESP1wasma plifiedusingrice(OryzasativaL．CV．Zhonghua11)genomicDNA astemplatebyPCR． OsESP1wasfurtherfusedwiht GUSreportergeneandtransformedintoricecallusthroughAgrobacterium—mediatedtransformation． GUSactivitiesinvarioustissuesoftransfomr ed plantswereexaminedandtheGUSactivity wasdetectedonlyin riceembryo， indicatinghteOsESP1isanembryo—specificpromoter． Keywords：Rice；Embryo—specificpromoter；Expressionpatternanalysis；GUSreportergene 植物类受体蛋白激酶[1