甘肃省马铃薯镰刀菌干腐病优势病原的分离鉴定.pdfVIP

植物病理学报 ACTAPHYTOPATHOLOGICA SINICA 41(5)：456—463(2011) 甘肃省马铃薯镰刀茵干腐病优势病原的分离鉴定 李金花 ，王 蒂 ，柴兆祥h，LesterW．Burgess。 (甘肃农业大学草业学院，兰州 730070；。甘肃省作物遗传改 良与种质创新重点实验室，兰州 730070 澳大利亚悉尼大学农业 、食品与自然资源学院，悉尼 2006) 摘要：为明确甘肃马铃薯镰刀菌干腐病的优势病原，2006年 l2月一2007年3月由西至东从甘肃张掖、天祝、永登、临洮、渭 源和西和等6县市的马铃薯贮藏窖中采集表现有镰刀菌干腐病症状的马铃薯薯块 ，以组织分离法分离病原，单孢纯化镰刀 菌 (Fuxariumsgp．)菌株后，以形态学为基础，参照Nelson镰刀菌分类系统进行鉴定。结果表 明：6个采样区共分离到293 株镰刀菌菌株，其中以接骨木镰刀菌(F．sambucinum)和茄病镰刀菌( solani)出现频率高，是优势种。分析发现第一优 势种随采样区而异，张掖、天祝和渭源采集的样品中茄病镰刀菌分离频率分别为42．6％、42．1％和32．4％，接骨木镰刀菌分 离频率分别为 14．8％、5．3％和26．5％，茄病镰刀菌为第一优势种 ；永登、临洮和西和采集的样品中接骨木镰刀菌分离频率 分别为5c2．1％、50．9％和55．2％，茄病镰刀菌的分离频率分别为23．3％、32．7％和20．7％，接骨木镰刀菌为第一优势种。 本文进一步对其在 PDA、CLA上的培养特征进行了观察和描述。按照柯赫 氏法则用混合菌株接种法对大西洋 (Atlantic)、 夏波蒂(Shepody)以及一地方品种进行致病性测定，证实了优势菌种对块茎的致病性。利用 EF-1a基因引物 (EF一1H和 EF-2T)对接骨木镰刀菌菌株 GAUF—F12进行基因组DNA的PCR扩增，将 PCR产物回收测序后在 GenBank上比对，菌株 GAUF—F12与GenBank登记的接骨木镰刀菌5个菌株的同源性均达 99％；用DNASTAR分析软件将同源性较高的登记菌 株的序列与GAUF—F12菌株构建同源性树，结果表明：该菌株与以上 5个接骨木镰刀菌菌株均位于同源性树的同一分支， 聚为一类，与形态学的鉴定结果一致。 关键词：马铃薯镰刀菌干腐病；优势病原；F sambucinum；F solani；EF．1a基因；PCR Isolationand identificationofthedom inantpathogenscausing potatoFusarium dry rotin Gansu Province LIJinhua，一，WANG Di，CHAIZhao—xiang，LesterW．BURGESS。 (PratacultumlCollege，GansuAgriculturalUniversity，Lanzhou730070，China；GansuKeyLab．ofCropImprovementand Germplasm Enhnacement，Lnazhou730070，China； FacultyofAgriculture，F0od andNaturalResources，TheUniversity of Sydney，Sydney2006，Australia) Abstract：Toknow thedominantpahtogensofpotatoFusarium drypotinGansu，tubersshowingsymptoms ofdryrotweresampledatfarmers’storagecavesinZhangyecity，Tianzhu，Yongdeng，Lintao，W eiyuanand XmeCOU[1tyfrom Feb．2006toMar．2007．Thepathogenswereisolatedbytissueisolationmethod．theFusa— rium obtainedwereidentifiedaccordingtothetaxonomicsystem ofNelsonafterbeingsub·c·ulturedna dsingle-· spored．Theresultsshowedthatthetotal293Fusarium isolateswereobtmnedfrom hte12storagecavesinsix sampfingsites，andthedominan