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植物病理学报
ACTAPHYTOPATHOLOGICA SINICA 41(5):546—550(2011)
柑橘黄龙病兼性厌氧型伴生细菌的
分离及优势菌群分析
李颜方 ,殷幼平 ,王玉玺 ,李 佳 ,陈世伟。,王中康
(重庆大学生物工程学院基因工程研究中心,重庆 400030;农业部全 国农 技术推广服务中心,北京 100126
。』’。利添生物科技发展 (合浦)有限公司,北海 536128)
Isolationoffacultativeanaerobicand entophyticbacteriacompanionedHuanglong—
bing pathogen—infected citrus tissues and determination of dominant bacterial
populations LIYan—fang ,YIN You—ping,WANG Yu.xi。,LIJia,CHEN Shi—wei。,WANG
Zhong—kang ‘ (Bioengineering College,ChongqingUniversity,Chongqing400030,China; Ministry ofAgriculture,
AgriculturalTechniqueExtensionandServiceCenter,Beijing100126,China;LuckyTeam BiotechDevelopment(Hepu)
Ltd.,C0.Hepu,Beihai536128,China)
Abstract:ToanalyzethediversityofentophyticbacteriaandfindthecompanionmicrobeinHuanglongbing
pathogen—infectedandhealthycitrusplanttissues,variouspartsofciturstissueswerecollectedfrom different
locationsofcitursplantingareas.Thefacultativeanaerobicandentophyticbacteriawereisolatedandidentified
basedonbacterialmorphology,physiology,biochemistrycharacteristicsandPCR—DGGEanalysis(denaturing
gradientgelelectrophoresis,analysisofthesequenceof16SrRNAV6一V8fragment).Bythedirectionalisola—
donofthefacultativeanaerobicandentophyticbacteriaand 16SrDNA amplificationmethods,total12genera
ofbacteriawere identified from 19 cultivablebacterialpopulations.Thedominantbacterialpopulationwere
Bacillussp.(IF:21.03%),Planococcussp.(IF:20.69%)andPseudomonassp.(IF:17.44%)inhealhty
citrustissues,whileCurtobacterium sp.(IF:29.07%),Bacillussp.(IF:23.12%),Microbacteriurnsp.
(IF:21.09%)ininfectedcitursplants.BasedontheresultsofDGGE,9generaofculturedbacteriawere
identified.ThedominantbacteriapopulationwasSerratiasp.(IF:28%),andPantoeasp.(IF:14%)was
secondonlytoit. ‘CandidatusLiberibacterasiaticus’wasfoundonly in tangerinepithofdeformed orange
furit,whichsuggestedthatthecontents(l%)ofHuanglongbingweremoreindiseasedfurits
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